自根苗的繁育

第三节　自根苗的繁育

自根苗是由无性繁殖方法获得的苗木，所以又称无性繁殖或营养繁殖。

一、自根苗的特点和利用

枸杞自根育苗的方法有枝条扦插、埋根、根蘖、压条和组织培养等。自根苗是用优良母株的枝、根、芽等营养器官生根繁殖而来，它保持母树的遗传特性而变异较少，生长一致，进入结果期较早，产量高，优良品种在生产上能迅速繁殖推广，繁殖方法简便。但自根苗无主根且根系分布较浅，容易倒伏，所以幼龄树要及时扶干。

二、自根苗繁殖生根的原理

自根苗繁殖的方法主要是利用枸杞营养器官的再生能力，发出新根新芽而长成一个完整的植株。能否长成完整植株，关键在于是否形成不定根或不定芽。枸杞形成不定芽、不定根的再生能力，依枸杞品种、枝条或根的发育年龄等不同而异。不论用根插或枝插均能形成不定芽或不定根，易成活。同一枸杞品种，不同的发育年龄和枝龄，其再生能力的强弱不同。处于幼年期的植株比成年期的发根能力强。半木质化的幼龄枝比木质化的多年生枝易于生根。枝龄小则皮层幼嫩，其分生组织的活力强，再生力也强，扦插易于成活。

（一）不定根的形成

不定根是由植物的茎、叶等器官发出，因其着生的位置不定，故称为不定根。多年生木本植物的不定根通常在枝条的次生木质部产生，有的果树其不定根则是从形成层和髓射线交界处产生。

大多数果树在扦插过程中，茎内某部分细胞恢复分裂能力，进行细胞反分化形成根原体，产生不定根。有些果树是在枝条生长期间未离开母树时，在茎组织内就已形成根原体，并多从形成层和髓射线交界处发生。据赵世华《无公害枸杞》一书中说，枸杞、葡萄的枝条在冬季休眠期，没有根原体，但插穗扦插以后较容易生根，看来它们的根原体是在扦插以后形成的。枸杞属的根原体数量较少，主要分布在种条基部60 cm以下的范围内，这就是老眼枝和七寸枝插穗成活率高，而徒长枝由于生长快，根原体不集中、稀少，成活率低的重要原因。

多数情况下，插条形成愈伤组织和发生不定根，是同时发生而又各自独立进行的，但有时先长愈伤组织后发根，因此，容易误认为不定根都是从愈伤组织长出来的。插条基部发生愈伤组织是扦插生根的主要条件，但有些树种插条基部，在适宜的温度和湿度条件下，能较快地产生许多愈伤组织而并不发根。枸杞插条也会发生这种情况。在扦插的枸杞插条中也可见到插条基部没长愈伤组织，但在节间或节部发出不定根。虽然愈伤组织与不定根不存在直接的关系，但愈伤组织对于防止病菌入侵和伤口腐烂，减少营养物质流失具有重要作用，并为发根创造了良好条件。

（二）不定芽的形成

定芽是指发生在茎的叶腋间，不定芽的发生则无一定位置，如根、茎、叶上都可能发生分化，但多数是在根上发生，这在繁殖上有重要意义。许多植物的根在未脱离母体时，特别在根受伤的情况下都容易形成不定芽。在年幼的根上，不定芽是在中柱鞘靠近维管形成层的地方产生。在老年根上，不定芽是在木栓形成层或射线增生的类似愈伤组织中发生的。在受伤的根上，主要在伤口面或切断根的伤口处愈伤组织中形成不定芽。

（三）极性

在扦插的再生过程中，器官的发育均有一定的极性现象。即枝条总是在其形态顶端抽生新芽，下端发生新根。用根段扦插时，在根段的形态顶端（远离根颈部位）形成根，而在其形态基端（靠近根颈部位）发出新芽。因此，扦插时要特别注意不能倒插。

（四）影响扦插成活的因素

1.内部因素

（1）树龄、枝龄、枝条部位通常从实生幼树上剪去的枝条扦插较易发根。随着树龄的增大，发根率降低。枝龄较小比枝龄较大的容易成活，因其皮层中幼嫩分生组织的生活力强。

（2）营养物质枝条所贮藏的营养物质的多少与扦插和压条生根成活有着密切的关系。据宁夏农科院农产品质量检测中心NoB2007-4346检测报告，枸杞枝条含粗纤维49.5mg/100 g，粗蛋白9.63mg/100 g，粗脂肪1.54mg/100 g，灰分3.98 mg/100 g。这些营养物质在形成根的过程中起促进作用。

（3）植物生长调节剂不同类型的生长调节剂如生长素、细胞分裂素、赤霉素、脱落酸等对根的分化有影响。吲哚乙酸、吲哚丁酸、萘乙酸对不定根的形成都有促进作用。细胞分裂素在无菌培养基上对不定芽的形成有促进作用。因此，凡含有植物激素较多的树种，扦插都较易生根。所以，枸杞扦插时用生长调节剂（吲哚丁酸或ABT粉等）处理可以促进生根。

（4）维生素维生素是植物营养物质之一。维生素B₁、维生素B₆、烟酸、甘氨酸、肌醇等是无菌培养基中促进外植体生根所必需的营养物质。维生素在植物叶中合成并输导至根部参与整个植株的生长过程。维生素和生长素混合使用，对促进发根有良好的效果。

2.外部因素

（1）温度插条生根的适宜土温为15℃～20℃或略高于平均气温3℃～5℃。所以，解决春季插条成活的关键在于采取措施提高土壤温度。

（2）湿度土壤湿度和空气湿度对扦插压条成活影响很大。插条发根前，芽萌发比根的形成早得多，而细胞的分裂、分化，根原体的形成，都需要一定的水分供应，所以，枝条扦插后，土壤含水量最好稳定在田间最大持水量的50%～60%，空气湿度越大越好。

（3）光照硬枝扦插可以是自然光照，嫩枝扦插需要遮光。但嫩枝扦插光照过少，插条死亡严重。所以连阴天要补充光照。

三、主要繁殖方法

扦插育苗是用植物体的枝条繁殖成新植株的一种方法，是无性繁殖的方法之一。它的最大优点是苗木能保持母树的优良性状，结果早，产量高，优良品种能在生产上迅速繁殖推广。根据插条的种类不同，它又可以分为硬枝扦插、嫩枝扦插以及埋根、根蘖、压条、组织培养育苗法。

（一）硬枝扦插

它是利用母树完全木质化的枝条进行苗木繁育的方法。

1.枝条采集

在枝条萌动前的3月下旬到4月上旬，选用采条圃里生长健壮、粗度0.3～0.6 cm的枝条，也可以采用枸杞茨园植株上的徒长枝，剪成12～15 cm长的插条，上剪口剪成平口，尽可能减少水分蒸发，下剪口剪成马耳形，避免倒处理和倒扦插。剪好的插条50个一捆，利于搬运和插条处理。

2.插条处理

硬枝插条用15～20mg/L的α-萘乙酸浸泡24 h或500～1000mg/L的α-萘乙酸浸泡2 h；15～20mg/L吲哚乙酸浸泡24 h或500～1000mg/L的吲哚丁酸浸泡2 h；浸泡枝条下部3 cm。

α-萘乙酸的配制方法：称取所需量的α-萘乙酸，先用少量95%的酒精溶解，完全溶解后再加水至一定浓度。

吲哚乙酸的配制方法：称取所需量的吲哚乙酸，先用少量95%的酒精溶解，完全溶解后再加水至一定浓度。

3.扦插时间

根据各地的气候条件，随时采条，及时扦插，一般在萌芽前3月下旬或4月上旬，温室也可以在9～10月份扦插。

4.扦插方法

按照5 cm×50 cm株行距开沟插入，填土踏实，插穗露土高度1～2 cm。在墒气差的土壤上育苗，也可以在开沟后，在沟内先倒水然后扦插。为保墒气和提高地温，促进生根发芽，在插条后覆盖地膜，发芽后揭去。此法操作简单，生产上已普遍采用。

（二）嫩枝扦插

嫩枝扦插育苗技术是利用半木质化的嫩枝作插穗，并将插穗培养成一个完整植株的过程。枸杞嫩枝扦插育苗一年四季均可进行。

嫩枝自被切离母体后，在新的根系没有生成前，不能从根部得到水分，养分的补充也受到很大限制，对环境的抵抗能力显著减弱，因此为插穗提供适宜的生根环境条件，需要建设较多的辅助设施。如育苗室设施、光照温度调节设施、水分补充设施等。

1.育苗室

育苗室是枸杞嫩枝扦插的重要设施之一。育苗室的类型有塑料拱棚、日光温室和现代工厂化育苗室三大类型。不同类型的温室环境控制系统的配置差异较大，对环境的监测和控制能力也有差异，种苗的生长速度和质量也不同。现代温室具备完善的加温、降温、遮阴、补光和灌溉自动控制系统，能够精确控制种苗不同培育阶段的环境条件。

（1）塑料拱棚：通常把不用砖石结构围护，只以竹、木、水泥或钢管等材料作为骨架，在表面覆盖塑料薄膜的大型保护地栽培设施称为塑料拱棚。

塑料拱棚按棚顶形状可以分为拱圆形和屋脊形；按骨架材料可以分为竹木结构、钢架混凝土柱结构、钢竹混合结构等；按连接方式又可分为单栋拱棚、双栋拱棚和多栋拱棚。塑料拱棚的棚顶多为拱圆形。

塑料拱棚最基本的骨架是由立柱、拱杆（拱架）、拉杆（纵梁、横拉）、压杆（压膜线）等部件组成，俗称“三杆一柱”。通常拱棚宽6～15m，高2.5～3.5m，长50～60m。内部净面积333～900m²。

（2）日光温室：日光温室由后墙、后屋面、前屋面和保温覆盖物四部分组成。主要是采用加厚的墙体以及保温御寒设备，大多以塑料薄膜作为采光覆盖材料，既能最大限度地采光又能充分利用太阳辐射能源，是适用于育苗和栽培的主要温室类型。

2.遮阴设施

夏天温度高，光照强，蒸腾系数大，必须通过遮阴设施来降低温室内的光照强度和温度，从而避免插穗叶片水分散失过多。在育苗温室顶部40 cm处安装遮阴网，能够有效降低温室内的光照强度和温度。遮阴网的材质以辐射率越小越好，一般选用黑色。

3.水分补充管道系统设施

喷雾补水设施是枸杞育苗室中的关键设施。带叶插穗在生根之前要保证叶面常有一层水膜，插穗才能保持正常的生理状态，特别是在炎热的夏天，若停止喷雾时间过长，就可使插穗发生不可逆转的萎蔫。但喷雾水分过多又常会造成插穗基部腐烂和扦插基质温度的降低，这些现象都会影响插条生根。根据插条的生理需要，近些年，微喷雾技术已经发展成为扦插育苗的一门新技术，它具有技术先进、节水、省工、高效、安装使用方便等优点。其主要结构包括：水源、首部枢纽、管网和喷水器等。

（1）水源：嫩枝扦插育苗应采用能饮用的井水或自来水，不可用含盐、碱等化合物的硬水，如用井水最好在大棚附近修建水池，一般3～5亩苗床需建不低于6m³的水池。水源要具备一定的压力，其压力可以通过水泵加压。

（2）首部枢纽：首部枢纽是控制水分的心脏，它包括水分控制仪、过滤器、电磁阀或水泵、球阀和逆止阀等。

①水分控制仪：微喷灌电脑控制仪，可以根据育苗温室温度的变化自动打开电磁阀或水泵进行喷水。

②提水设备：采用细管道、低流量、较高水压的微喷灌管道系统进行间歇喷雾，要靠水泵的压力来完成，其水泵功率的大小，由喷灌面积所需水量和所需水压来确定。为了防止水倒流，应在水泵出水管处安装逆止阀以保护水泵的安全。此外，由于井水的水温比较低，用井水直接喷雾，对插条生根不利，应在苗床附近修建水池，经日光增温后再使用。如采用自来水作为水源时，需要安装过滤器和电磁阀，以便控制水源。在水分控制仪的控制下，可实现自动化供水管理。

（3）输水管网系统：管网是输水部分，管网包括主管、支管、毛管和闸阀等。为了满足扦插育苗喷雾均匀的要求，应根据实际情况匹配相应大小的主管和支管。管材一般为聚乙烯黑管，并具有防止老化的作用。比如当主管道流量在7～10m³/h时可选用准40mm管，流量在4～7m³/h时可选用准32mm管；支管可根据喷水量的多少来确定使用准25mm管或准20mm管，一般流量在2～4m³/h时可选用准25mm管，流量在2m³/h以下时可选用准20mm管。其管网组合可采用，如主管为40mm管，支管可配25mm管；如主管为32mm管，支管可配20mm管的组合方式。每个组合管网的规模大小由插床面积和喷雾方式来决定。

（4）喷雾方式：喷雾方式分悬挂式和地插式两种。悬挂式又分移动式和固定式两种，优点是喷雾细腻，雾化好，水分分布均匀，又能起到降温作用；缺点是用材多、成本高，单个喷头喷雾覆盖面积小，喷雾直径1.4m左右。地插式喷雾又分自动化和手工喷雾两种，喷雾出细小水滴、喷雾范围大多在3～4m，虽然安装成本低，但喷雾的水分多少不易掌握。但无论采用哪种方式都要做到水分喷雾分布均匀。

4.苗床

苗床分起垄和不起垄两种。起垄的好处是熟土层深厚、疏松透气,有利于生根长苗，不方便的是费工费时，可利用空间少。起垄苗床不会因为喷雾方式的改变导致苗床板结而不利于根系生长。不起垄的苗床可利用面积大，但会因为喷雾方式不当易使苗床地板结而不利于根系的生长。

（1）苗床处理：在土壤表面撒入腐熟的有机质肥料和防治地下害虫的药剂（多为辛硫磷、毒死蜱等），施入量为有机肥每亩3～4m³，杀虫剂每亩4～5 kg，然后进行旋耕，旋耕混匀后起垄。为了扦插人员操作方便，扦插时不破坏苗床，一般苗床的宽度为1.2m左右，长度方向随设施方向。起垄的高度一般距垄底20～25 cm。设施内的苗床数根据设施宽度决定，一般3～4床。起垄后在垄上铺3～4 cm厚的细沙，嫩枝扦插着生苗床的基质多为没有有机质的细风沙或细河沙。细沙铺好后刮平，使用杀菌剂如多菌灵、百菌清、代森锰锌、甲基托布津等杀菌，杀菌浓度按照说明书使用要求配制或浓度略大一些，使用量以床面着生的基质（沙子）湿透为准。

（2）打孔器的制作：由于插条是半木质化的，在扦插过程中易损伤表皮，需要在苗床上打孔。制作打孔器先用准10～12mm的钢筋焊接成框架，然后在框架上焊接准6mm的钢筋段，每段钢筋长3 cm。按照嫩枝扦插4 cm×8 cm的株行距，焊接长度以苗床的宽度为宜，焊接宽度视情况而定，一般焊接6～8行。

5.穴盘

穴盘多用于现代化工厂育苗。穴盘育苗的优点是占地少、育苗量大、一次建成的设施可以重复利用。但需要专门的穴盘和基质，而且还需要二次移栽，比较烦琐，用工量大，成本相对较高。

（1）穴盘的选择：枸杞育苗穴盘规格通常用50穴/盘，穴口5cm×5 cm，穴深5～8 cm。常用的5 cm×5 cm×8 cm。

（2）基质的选择和消毒：育苗基质应具有优良的理化特性，疏松透气，保水保肥，化学性质稳定，呈微酸性，不带病菌、虫卵、杂草种子以及对插穗有危害的物质。基质的主要原料是草炭和蛭石，但由于穴盘内基质用量很少，易干燥或缺肥，因此，基质里也常混以珍珠岩、腐叶土、腐熟堆肥、优质壤土等，一般2～3种混匀过筛即可。枸杞嫩枝扦插育苗基质也可以使用商品用的蔬菜育苗基质，基质营养供应为45～60 d。

穴盘育苗可以直接扦插，不需要打孔。现代化育苗温室有专用的苗床，摆放在土床上的穴盘苗，穴盘摆放时要留有人行道。为防止根系扎入土壤，当苗生长40～50 d后即可移栽。

6.插穗采集

在专门建立的采穗圃采集或使用枸杞生长季节生产园的枝条，都需要做到品种明晰、纯正，没有大的病虫危害，叶片整齐，枝条健壮，剪截长度6～8 cm，下部3 cm去除，插穗随剪随插，插穗放置时间不要过长。

7.插条处理

枸杞是易生根的植物，插条用α-萘乙酸和吲哚丁酸1∶1的混合液处理即可，配制浓度为200～300mg/kg。也可购买市售生根粉，如ABT、生根宝等，浓度依生根粉使用要求配制。将配制好的生根剂用滑石粉调成糊状，速蘸插条下端1.5～2.0 cm后扦插。也可以不使用滑石粉，将插穗码好，在生根剂中浸泡1～2min后直接扦插。

8.嫩枝扦插注意事项

（1）插穗要随截随用。

（2）在整棚扦插没有完成前，每插一段苗床，大约20min，必须喷雾一次，以免插穗失水。

（3）整棚插完后迅速封棚。插完当天最后一次喷雾后，全棚用杀菌剂喷雾一次杀菌，插后前三天每天早晨进棚，检查全棚是否有管道堵塞、喷雾不到位或积水等不良反应。三天后视棚内情况进行检查，主要检查水分补充情况、病虫害发生情况。

（三）埋根育苗

埋根育苗为无性繁殖。

露天埋根在3月下旬至4月上旬，温室埋根在9月下旬至10下旬，多数情况下是在春季苗圃起苗时，将粗度在0.5 cm左右的侧根收集起来，剪成10 cm左右长度，侧根段下部3 cm用15～20mg/L的α-萘乙酸浸泡24 h，按10 cm×40 cm的株行距开10 cm深的育苗沟，把浸泡后的侧根段斜放在一边的沟壁上，然后埋土填实，根上端露出地面约0.5 cm，覆上塑料薄膜。发芽后揭去膜。它的管理方法与硬枝扦插相同。

埋根育苗容易成活，由于根条来源少，不适应生产上大量繁殖。生产上不普遍采用。

（四）根蘖育苗

根蘖育苗为无性繁殖。

枸杞根很容易由不定芽萌发长成新植株，培育成根蘖苗，由于根蘖苗是由母树根系形成的，所以它能保持母树的优良性状。在生产上利用根蘖苗，既不需要另设苗圃专门管理，又无费工费时的育苗环节，从母树根上挖取后就可栽植，成活率高。这种方法简单，在生产上普遍采用。

由于根蘖育苗是在生产园里进行，为了保证苗木的质量，应注意以下几点。

一是根蘖育苗必须在品质优良、品种纯一的枸杞园内进行，避免混入劣质种苗。

二是严防实生苗混入。枸杞果实成熟后自然落地或采摘时掉在地上，如果土壤的墒气好，落地种子会萌发长成树苗。这种实生苗的变异性大，不能保持母树的优良性状，一般不宜采用。因此在挖根蘖苗时，一定要正确区分根蘖苗和实生苗。由于根蘖苗是有母树根系形成的，它的末端带有“T”形根；若是实生苗，其主根发达，无“T”形根。

三是挖根蘖苗时，把那段母根也一同挖取，一般长约10 cm，因侧根多，栽后容易成活。

（五）压条育苗

压条育苗为无性繁殖。枸杞是较容易生根的树种，将它的枝条和母树在不分离的情况下埋入土里，可以生根，然后把枝条和母树分开就成为新植株。具体做法：在春、夏季选树冠下部匍匐在地面上的枝条，划伤后埋在树冠下约10 cm深的压条沟里，填埋湿润土壤，踏实，并经常保持湿润，大约1月可生根。

（六）组织培养育苗技术

1.组织培养的概念和利用

组织培养育苗是运用现代生物技术快速繁殖苗木的一种方法，它是利用细胞的“全能性”，把植物组织（如根、茎、叶、花药、胚等）通过无菌操作接种于人工配制的培养基上，在一定的温度和光照条件下，离体培养使之生长发育成完整植株的方法，这种方法称为组织培养。因为上述组织、器官或细胞是在试管（或三角瓶）内培养，故又称为试管培养或离体培养。供组织培养的材料（器官、愈伤组织、细胞、原生质体或胚）称为外植体。外植体的最初培养称为初代培养或起始培养。将初代培养获得的培养体移植于新鲜培养基中，经过多次转移增殖称为继代培养。外植体在人工培养条件下，通过细胞分裂逐渐丧失其原有的结构和功能，形成新的愈伤组织，这一过程称为“脱分化”。经过“脱分化”的组织和细胞，可以进行再分化，出现分生组织突起、周皮和维管束形成层等。分生组织突起可诱导出完全分化的根和芽，称为“器官形成”，进而形成小植株。

枸杞组织培养根据外植体材料不同可分为：茎尖培养、茎段培养、叶培养、胚乳培养、下胚轴原生质体培养、胚培养、髓部细胞悬浮培养，等等。利用组织培养方法繁殖枸杞苗木，具有占地面积小、繁殖周期短、繁殖系数高和周年繁殖等特点。对于大量繁殖优良种苗、脱毒苗，建立高标准和无病毒果园，适应苗木生产向现代化发展，具有重要意义。

2.组织培养中培养基的营养成分

培养基是外植体赖以生长和发育的基质，适宜的培养基是获得组培成功的关键。目前枸杞常用的培养基为MS（Murashige和Skoog，1962）培养基。主要成分包括各种无机盐（大量元素和微量元素）、有机化合物（蔗糖、维生素类、氨基酸、核酸或其他水解物）、螯合剂（EDTA）和植物激素。

（1）无机盐类

①大量元素：除碳、氢、氧外，还有氮、磷、钾、钙、硫、镁等大量元素。氮常用的氮素有硝态氮（如硝酸钾等）和铵态氮（如硫酸铵等）。有了适量的氮源培养物才能良好生长，大多数培养基都用硝态氮，只有MS培养基和B5培养基采用硝态氮和铵态氮的混合物。此外，氨基酸类也可以作为植物组织培养中的氮源。磷是植物必需的元素之一，在组织培养中，培养物也需要大量的磷，磷与蛋白质合成有关。钾、钙、硫、镁等影响组织培养中酶的活性和方向，决定着新陈代谢的过程。

②微量元素：微量是指低于10^-5～10^-7摩尔浓度，植物对这些元素的需要量极微，稍多即发生毒害。微量元素如铁、铜、锌、锰、钴、钠、硼等。铁是植物组织延长生长所必需的一种元素；铜可促进离体根的生长；钠是酶的组成成分，有防止叶绿素破坏的作用；锰与植物呼吸作用和光合作用有关；硼影响蛋白质合成等。

（2）有机化合物

①蔗糖：糖是植物组织培养中不可缺少的碳源，在培养基中加入一定的糖，既可作为碳源，又可维持一定的渗透压（一般在1.5～4.1大气压范围内）。由于植物组织不同，糖的最适浓度也有差异。

②维生素类：维生素在植物组织中非常重要，因为它直接参加生物催化剂——酶的形成，以及蛋白质、脂肪的代谢等重要的生命活动。在组织培养中，常用的维生素浓度在0.1～1mg/L。维生素的种类很多，其中主要是B族维生素，如维生素B₁、维生素B₆、维生素B₁₂、烟酸（维生素PP）、生物素（维生素H）等。肌醇本身没有促进生长的作用，但有帮助活性物质发挥作用的效果，所以它能使培养物快速生长，对胚状体和芽的形成有良好的影响。在培养基中加入1mg/L的肌醇就足以影响维生素B₁的效应。植物组织能忍受较高含量的肌醇，在含量1000mg/L肌醇的培养基上，组织仍不失活力。肌醇一般用量50～100mg/L。

③氨基酸：氨基酸是蛋白质的组成成分。常用的氨基酸为甘氨酸。

（3）植物激素

植物激素对于组织培养中器官的形成起着明显的调节作用，其中影响最显著的是生长素和细胞分裂素。使用激素要注意种类和浓度、生长素和细胞分裂素之比。一般认为，生长素和细胞分裂素的比值大时，利于根的形成；比值小时，则促进芽的形成。常用的生长素和细胞分裂素有以下几种。

①生长素：有IAA（吲哚乙酸）、NAA（萘乙酸）、2，4-D（2，4-二氯苯氧乙酸）、IBA（吲哚丁酸）等。

②细胞分裂素：有KT、BA（6-苄基嘌呤）、Z（玉米素）、GA₃（赤霉素）等。细胞分裂素的主要作用是促进细胞的分裂和分化，延迟组织的衰老并增强蛋白质的合成。细胞分裂素还能显著改变其他激素的作用。

3.MS培养基母液的配制

经常使用的培养基，可以先将各种药品配制成10倍或100倍母液，放入冰箱内保存，使用时再按比例稀释。一般配制成大量元素、微量元素、维生素、铁盐母液。枸杞采用的是以MS为基础的培养基。大量元素配制成10倍母液；微量元素、维生素、铁盐配制成100倍母液。具体母液配制如下。

大量元素：配制成10倍母液。（单位：mg/L）

大量元素母液配成10倍液。用感量0.01 g天平称取，分别溶解后顺次混合，Ca²⁺和PO₄³-一起溶解易产生沉淀。一般先将前4种药物溶解混合后，加水至一定量，将CaCl₂·2H₂O单独溶解后，再和前4种溶液混合，最后定溶至1000 ml。每升培养基取100ml。

微量元素：配制成100倍母液。（单位：mg/L）

微量元素母液配制成100倍液。用感量0.001 g分析天平称取，分别溶解后顺次混合，混合后加水定容至1000ml。每升培养基取10ml。

维生素母液配制成100倍液。用感量0.001 g分析天平称取，分别溶解，混合后加水定容至1000ml。每升培养基取10ml。

铁盐用感量0.001 g分析天平称取，分别溶解后混合，混合后加水定容至1000ml。每升培养基取10ml。

植物激素的配置：一般将植物激素配制成0.1～0.5mg/ml的溶液。由于多数植物激素难溶于水，可以用以下方法配制。

①IAA　先溶于少量95%酒精中，再加水至一定浓度。

②NAA　可溶于热水中，或用少量95%酒精完全溶解后，再加水至一定浓度。

③2，4-D　不溶于水，可用1N的NaOH完全溶解后，再加水至一定浓度。

④KT、BA　先用少量的1N的HCl完全溶解后，再加水至一定浓度。

配好的母液需保存于冰箱中，温度控制在2℃～4℃，定期检查有无沉淀或微生物的污染。如出现浑浊或沉淀、霉菌，则不可再用。

4.MS培养基的制作

枸杞分化培养基配方：MS+0.2 mg/L 6-BA+0.01mg/LNAA+30 g/L+5 g琼脂，pH5.8

MS：大量元素100ml/L、微量元素10ml/L、维生素10ml/L、铁盐10m l/L。

枸杞生根培养基配方：1/2MS+0.01mg/L 6-BA+0.1mg/LNAA+30 g/L+5 g琼脂，pH5.8

MS：大量元素50ml/L、微量元素5ml/L、维生素5ml/L、铁盐5ml/L。

具体制作过程：①在锅中加入适量的蒸馏水，放入琼脂使其溶化。②把MS混合溶液、蔗糖加入锅中，搅拌均匀。③再将植物激素用吸管吸取也加入。④用1N的NaOH或1N的HCl溶液调节培养基pH5.8。⑤将做好的培养基分装到事先准备好的三角瓶中封口。⑥灭菌。一般采用101 kg/cm²消毒15～20min。时间过长或温度过高会引起不良后果。灭菌后的培养基应平放。培养基经过灭菌以后往往会发生一些不利的变化。由于某些成分的分解或氧化（如蔗糖的分解），会增加培养基的酸度（pH值一般可降低0.2）。有时也会因容器质量较差，其中一部分物质溶解，影响酸度变化。培养基中的磷酸盐往往与铁离子结合形成沉淀，在中性或碱性条件下更易形成。在实际工作中，少量的沉淀影响不大。

5.培养材料的消毒

用于接种的材料必须先进行消毒，表面消毒剂的选择、消毒剂的浓度、消毒的时间根据所取材料决定。通常情况下植物组织内部多半是无菌的，这种材料常用表面消毒的方法就能收到理想效果。但是，当植物组织内部有细菌和霉菌存在时，灭菌就很困难。在这种情况下，可在培养基内加入少量的抗生素，既可控制细菌和霉菌，又不影响组织的生长，从而达到植物组织的无菌化。

枸杞组织培养使用的表面消毒剂通常是70%的酒精和0.1%的氯化汞溶液。具体做法是：从田间采回枸杞嫩茎，用自来水冲洗干净，剪去嫩茎上的叶片，在无菌超净工作台上，先将嫩茎放入70%的酒精溶液中浸泡几秒钟，倒出酒精溶液，用无菌水冲洗3次，再放入到0.1%的氯化汞溶液中浸泡5～8min，倒出氯化汞溶液，用无菌水冲洗3～4次后，夹出放到事先灭过菌的滤纸上，吸水待用。

6.接种

（1）芽的诱导：经过消毒的接种材料（嫩茎），在超净工作台无菌条件下，切成2 cm长的小段，每个小段带有1～2个小芽，接种在分化培养基上，放在培养室内进行培养。10 d后顶芽和腋芽开始萌发生长，一个月后接种的一个小段嫩茎可以分化出几株无根苗，可供继代培养用。

（2）无根苗的繁殖：将分化培养基上诱导出来的无根苗，在无菌条件下剪下，切成1.5～2 cm长的小段，每个小段至少带有1～2个小芽，重新接种到分化培养基上培养，一个月后接种的茎段又分化出许多无根的小苗。为完整植株的培养提供大量的材料。

（3）完整植株的诱导：将无根苗在无菌条件下剪下，切成1.5～2 cm长的小段，接种到生根培养基上，一星期后接种的无根苗开始生根，两星期后约有80%的无根苗生根。当根长1cm时就可以炼苗移栽。

7.培养条件

（1）光照：日光灯，光照时间12 h/d，光照强度2000 lx。

（2）温度：在组织培养中，一般均用恒温条件（25±2）℃。低于15℃会使培养物生长停止，高于35℃对生长也不利。

（3）湿度：在组织培养中湿度的影响有两个方面，一是培养容器内的湿度条件，二是环境的湿度条件。在培养物的周围即容器内的环境中，相对湿度几乎是100%，而对于环境的相对湿度要求则是70%～80%。环境的相对湿度能直接影响培养基的水分蒸发，相对湿度过低时，会使培养基的水分大量丧失，从而改变培养基中各种物质的浓度，使渗透压提高，同时改变培养基的物理性质，进而影响培养物的生长和分化。但是，相对湿度过高时，透气孔容易长霉，霉菌菌丝向内侵入到培养基上，会造成大量污染。在实际工作中，对环境的湿度条件很少进行人工控制。

（4）pH值：在组织培养中通常用的pH值为5.5～6.5。pH 4.0以下或pH 7.0以上对生长都不利。枸杞培养基的pH值为5.8。

（5）渗透压：糖的浓度对器官分化的影响，与改变培养基的渗透压有关。MS渗透压为1.9大气压。枸杞培养基中蔗糖的浓度为3%。

8.组培苗的驯化和移栽

将生根苗从培养瓶移栽到土壤中，常因外部环境条件变化较大而造成成活率较低，在瓶内培养基上发生的根系无根毛，茎输导组织和保护组织发育不健全，叶片栅栏组织少，叶片气孔在干旱条件下缺乏关闭功能，移栽后容易失水，降低成活率。因此，移栽前需要通过驯化，提高组培苗适应外界条件变化的能力。

提高枸杞组培苗移栽成活率有以下几种方法。

（1）将生根培养瓶苗放在地面温度＜35℃，20000～35000 lx强光下闭瓶锻炼1周。当幼茎呈红色、叶片浓绿时，再开瓶锻炼2～3 d。

（2）将经过强光锻炼的生根苗移栽于营养钵中（基质为1/2沙壤土与1/2蛭石混合），并将营养钵置于温室或塑料大棚内，保持相对湿度85%～100%，日平均温度25℃左右，光照强度10000 lx左右。1周后揭膜过渡锻炼2～4周，直接栽于苗圃中。

四、苗圃的管理

不论是种子育苗，还是器官育苗，只要生根，长出幼苗，就标志着育苗成功，已进入苗木管理期。加强苗木管理是培养壮苗、大苗的重要环节。

（一）种子苗管理

1.间苗

当年生播种苗苗高达3～5 cm时，进行第一次间苗工作。间苗工作要求间除过密苗和生长势弱小的苗木，株间距为5 cm左右。

2.除草和松土

除草和松土一年中要进行2～3次，结合间苗工作，开始除草和松土。尤其是采取水播法育苗，由于苗木未出土之前经常保持湿润状态，要灌水几次，每灌一次水就要长出许多杂草，就造成不同程度的板结。当苗木高度达到3～5 cm时，要抓紧第一次松土和除草工作，如果这项工作抓得不紧，就有造成草荒的可能。除草工作应掌握除早、除小、除净的原则。松土结合除草进行，在苗木未到速生期之前以松土为主，在苗木进入速生期后以除草为主。

3.定苗

当株高达到8～10 cm时，苗木即将进入速生期之前进行定苗。定苗的株距主要是根据每亩苗量和苗木培养的规格大小而定。过密营养面积不够，很难当年培育出合格苗木；过稀产量苗不够，一般定苗株距10～15 cm。

4.灌水和施肥

定苗之后，苗木即将进入速生生长阶段，这时要开始灌水和施肥，以良好的水肥条件促使苗木快长。灌水在苗木培育期进行4～5次，施肥2～3次。苗木生长后期控制灌水，对积水应及时排除。

5.抹芽

当苗高长到20～30 cm时，要及时抹除和剪去苗木基部发生的侧芽和侧枝，只保留距地面45～60 cm的侧芽；当苗高达60 cm时，及时摘心控制高生长。通过苗期对其修剪以达到在苗圃内培养出第一层侧枝的目的。

6.病虫害防治

枸杞苗期的害虫主要有枸杞蚜虫、枸杞瘿螨、枸杞锈螨、枸杞木虱、枸杞负泥虫，多采用药物防治，药剂的选择和成龄枸杞相同，具体见第九章。农业防治措施还应加强综合治理，搞好苗圃环境卫生，做到圃内无杂草。

（二）嫩枝扦插管理

1.扦插生根完成前管理

（1）光照　不同季节，不同设施。常见冬季11～次年3月，一般使用75%的遮阴网，遮阴时间为11～16点，其余时间全光照，阴天不遮阴。春夏季5～7月使用85%～90%遮阴网。8～9月使用80%遮阴网。

（2）水分　冬季12月至次年3月，每天喷雾2～3次，一次30～60 s，保持湿度85%。夏季4～5次，视天气情况定。

（3）温度　夏季棚温高温控制在40℃左右，低温在25℃以上。当棚内气温长时间高温时要适当增加喷雾次数。

（4）病害　随时检查，少量的人工捡除，并定点喷施杀菌剂，及时剔除病原菌，有大量发生迹象时，在傍晚进行一次全棚杀菌。

一般情况下，夏季10～20 d为集中生根期，冬季15～25 d为集中生根期。生根期结束后适当小通风，或晚上通风。小通风10 d左右就可大通风。这段时间尽管插穗已经生根，但根系吸收能力弱，要及时喷施叶面肥补充营养和水分。一般沙床扦插成活率可达到60%～80%，工厂化育苗成活率可达到90%以上。

2.生根后的管理

大通风后由于水分散失快，苗床容易失水，补充水分时要使苗床喷透。等苗木长到15～20 cm时去掉遮阴网，棚膜白天揭开降温通风，晚上覆盖保温保湿，当苗木高30 cm以后，棚膜完全去掉，使其自然生长。如果秋季育苗过晚，要一直覆盖到自然生长落叶为止。在管理过程中随时除草，防止病虫害。

（三）硬枝扦插管理

1.破膜

这是硬枝扦插育苗很重要的环节，扦插发芽后要及时破膜，以免因气温高而烧苗。破膜工作有整行破膜和以苗破膜两种，无论采用哪种方式，破膜后都要及时用土将地膜压好，使覆盖工作继续起到增加地温和除草的作用，保证枸杞多生根，快生长。

2.施肥、灌水、除草和病虫害防治

硬枝扦插的插穗是先发芽后生根，幼苗生长高度在15 cm以下时应加强土壤管理，多中耕，深度10 cm左右，防止土表板结，增强土壤通透性，促进新根萌生。待幼苗长至15～20 cm时，灌一次水，每亩灌水40～50m³，地面不积水不漏灌。约20 d后结合追肥再灌一次水，每亩施入纯氮3 kg，纯磷3 kg，纯钾3 kg，行间开沟施入，拌土封沟。枸杞苗期易发生蚜虫和负泥虫，使用1.5%苦参素1200倍液或1.5%扑虱蚜2000倍液喷雾防治。如果覆盖地膜，当插穗发芽幼茎长至1～2 cm高时，要及时破膜，避免烧伤幼苗。硬枝扦插育苗，春季扦插；当年成苗，秋后或第二年春天苗木可出圃移栽。

3.修剪

硬枝扦插育苗，当苗生长到20 cm以上时，选一健壮直立徒长枝做主干，将其余萌生的枝条剪除。苗生长到50 cm以上时剪顶，促进苗木主干增粗生长和分生侧枝生长，提高苗木木质化质量。

4.增设扶干设备

枸杞苗木通过摘心、短截等措施，能及时促发出一次枝、二次枝。但由于这时苗木主干细，主干木质化程度低，支撑树冠能力很弱，留枝太多，苗木就压倒在地面。要解决这个问题，可以在苗木封顶、摘心的同时，以株或以行增施扶干设备，增加主干的支撑能力，多留枝，多长叶，实现培养特级苗的目的。

（四）根蘖苗的管理

根蘖育苗一般在栽后3年的枸杞园就可生产，在3～7年龄枸杞园生产量最大。要获得尽可能多的根蘖苗，在生产管理上，必须抓好两个技术环节。一是上年秋施肥，必须深施，挖穴施肥时，必须挖断一定的根系。在挖断的根系中，绝大部分根系继续成活，第二年在不定芽处容易长出新的幼苗。二是当年早春（3月下旬）浅翻枸杞园，能明显提高地温，有利于断根不定芽的萌芽，长出幼苗。根蘖苗出土后没有缓长期，生长很快。有些地方出苗多，有些地方出苗少。对过密的苗木，要及时从地表以下部分剪除。留下的苗木要及时剪除从地面到45 cm以内的侧枝。以后的修剪同硬枝苗木培育相近，但注意缓和生长势，在骨干枝的培养上，主枝与主干的夹角要大于硬枝扦插苗的夹角。

（五）组培苗的管理

移栽后的组培苗要做好保温、保湿、遮阴工作。成活后的管理参照硬枝扦插管理。