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血清总测定

时间:2022-04-14 理论教育 版权反馈
【摘要】:在绝大多数过敏的患者或具有遗传过敏体质的儿童中,血清总IgE抗体的浓度高于正常值,通过检测大部分常见的过敏原或总IgE抗体可以诊断是否存在过敏反应。

IgE是1966年发现的一类分泌型免疫球蛋白,分子量为188kD,由两条轻链和两条重链组成,ε链有4个CH(Cε1~Cε4),无铰链区,含有较多的半胱氨酸和甲硫氨酸。它由鼻咽、扁桃体、支气管、胃肠黏膜等处固有层的浆细胞产生,这些部位常是变应原入侵和Ⅰ型变态反应发生的场所。IgE为亲细胞抗体,Cε2和Cε3功能区可与嗜碱性粒细胞、肥大细胞膜上高亲和力FcεRⅠ结合。变应原再次进入机体与已固定在嗜碱性粒细胞、肥大细胞上IgE结合,可引起Ⅰ型变态反应。其最明显的基本生物学特性是亲同种细胞性,人的IgE只能使人及猴的细胞致敏,而不能使其他动物过敏。IgE是免疫球蛋白中对热最不稳定者,56℃、30min可使IgE丧失生物学活性。在5种免疫球蛋白中,IgE半衰期最短,并且具有最高的分解率和最低的合成率,因此在血清中含量极低,仅占血清总Ig的0.002%,在个体发育中合成较晚。

IgE抗体是亲细胞性抗体,吸附于组织的肥大细胞或血液中嗜碱性细胞或表面受体上,当机体在遇到同一抗原时,则在肥大细胞表面发生抗原-抗体反应,使细胞膜上的腺苷酸环化酶受到抑制,从而使细胞内Camp含量降低,导致细胞内嗜碱性颗粒脱落,结果引起肥大细胞等脱颗粒反应,释放其中的化学介质,如组胺、嗜酸性细胞趋化因子等。这些介质作用于皮肤、胃肠道及呼吸道黏膜等靶器官,引起局部平滑肌痉挛,血管通透性增高,微血管扩张充血,血浆外渗,组织水肿,腺体分泌亢进及嗜中性粒细胞增多等,进而导致各种相应临床表现。

IgE抗体的存在可使机体在接触特异性过敏原时主要引发速发型过敏反应。因此,测定血清中总IgE抗体的水平有助于判定机体对过敏的易感性。在绝大多数过敏的患者或具有遗传过敏体质的儿童中,血清总IgE抗体的浓度高于正常值,通过检测大部分常见的过敏原或总IgE抗体可以诊断是否存在过敏反应。过敏的临床症状包括过敏反应、花粉热、气喘、过敏性湿疹、皮炎、呼吸不畅和鼻炎。

【检测原理】 本试验采用定性的酶免疫分析法,可同时独立检测各种常见的过敏反应,并可估计人血清或血浆中IgE的总水平。在反应管中含有一系列包被有单一过敏原或过敏原混合物或单克隆抗体的塑料段,血清中的IgE抗体与包被的物质结合形成免疫复合物而沉淀,随后与结合物反应和底物分别发生反应,产生由黄到紫的颜色变化,从而诊断过敏反应的存在。

【适应证】

1.特应症,如婴儿期特应性皮炎。

2.变态反应病,可用于婴儿期特应性皮炎与脂溢性皮炎,变态反应性支气管哮喘、慢性鼻炎及窦炎鉴别诊断。

3.与嗜酸性粒细胞增多症或不明原因发热有关的疾病。

4.怀疑与寄生虫感染有关的不明原因的嗜酸性粒细胞增多症。

5.肺部嗜酸性粒细胞浸润、变态反应性曲霉病、变态反应性肺泡炎等疾病的进一步诊断。

6.其他疾病:如先天性免疫缺陷综合征,HIV感染,移植抗宿主反应,严重烧伤等。

标本采集】 血清。

【操作方法】

1.去掉尾端的白色封头和顶端的红盖,让反应管内的缓冲液排出。用纱布擦拭细头。

2.将注射器接在反应管的顶端,将标本由细头抽到注射器接头处。

3.将反应管平放,在室温下(18~30℃)反应100min。

4.将标本从反应管中排出,抽出注射器的推杆,由注射器针筒向反应管内注入1ml清洗液,将注射器的推杆插入并推到底,用纱布擦拭细头。

5.将绿色的结合液由细头抽到注射器的接头处。

6.将反应管平放,在室温下(18~30℃)反应100min。

7.将结合液由反应管中排出,抽出注射器的推杆。加5滴清洗液到注射器针筒中,让它流下。再在注射器针筒内注入1ml清洗液,让它流过反应管。将注射器的推杆插入并推到底,用纱布擦拭细头。

8.在塑料烧杯中注入少量(约2ml)清洗液。通过反应管将清洗液抽到注射器中。抽出注射器的推杆,让清洗液流出。

9.在注射器针筒内注入1ml清洗液,让它自然流下。重复一次。将注射器的推杆插入并推到底,用纱布擦拭细头。

10.将黄色的底物/指示剂通过反应管抽到注射器中。

【结果判读】 平放反应管,强阳性标本在5min内可观察由黄到紫的颜色变化,弱阳性标本在90min内观察颜色变化。

【参考范围】 阴性。

【临床意义】

1.变态反应病的观察 血清总IgE常可见于花粉季节。变态反应性皮炎患者的血清总IgE水平升高,浓度可达10 000U/ml甚至更高。

2.特应症 脐带血IgE升高至>0.9U/ml与特应症的产生风险相关。但IgE<0.9U/ml并不排除将来发生特应症的可能性。

3.与免疫缺陷相关的疾病 总IgE升高可见于一些遗传性免疫缺陷者,尤其是细胞免疫缺陷者。HIV感染的某个时期也会出现IgE水平的升高。

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