单克隆抗体生产技术

项目二　单克隆抗体生产技术

免疫反应是人类对疾病具有抵抗力的重要因素。人类提高免疫的途径已经从体内被动产生发展到体外主动防疫，从而增强对疾病的抵抗力。

抗体的特异性取决于抗原分子的决定簇。各种抗原分子具有很多抗原决定簇，免疫动物所产生的抗体实为多种抗体的混合物（多抗），用这种传统方法制备抗体效率低、产量有限，且动物抗体注入人体会产生严重的过敏反应。此外，要把这些不同的抗体分开也极为困难。近年来，将B淋巴细胞制造专一抗体进行培养可得到由单细胞经分裂增殖而形成的细胞群，即单克隆。单克隆细胞将合成针对一种抗原决定簇的抗体，称为单克隆抗体（单抗）。

单克隆抗体的大量生产得益于杂交瘤技术（图2-9）的创建，此技术被誉为免疫学上的一次革命，广泛用于各种单克隆抗体的制备。将预定抗原免疫的B淋巴细胞与能在体外培养中无限制生长的骨髓瘤细胞融合，形成B淋巴细胞杂交瘤。这种杂交瘤细胞具有双亲细胞的特征，既像骨髓瘤细胞一样在体外培养中能无限地快速增殖且永生不死，又能像B淋巴细胞那样合成和分泌特异性抗体。通过克隆化可得到来自单个杂交瘤细胞的单克隆系，即杂交瘤细胞系，它所产生的抗体是针对同一抗原决定簇的高度同质的抗体，即单克隆抗体（monoclonal　antibody，McAb），简称单抗。与多抗相比，单抗纯度高，专一性强，重复性好，且能持续地无限量供应。单抗技术的问世，不仅带来了免疫学领域里的一次革命，而且它在生物科学、医学的各个领域获得极广泛的应用，促进了众多学科的发展。

图2-9　杂交瘤技术过程示意图

本项目主要介绍单克隆抗体生产技术，包括动物免疫，细胞融合，单克隆抗体的筛选、鉴定、纯化以及应用，通过本项目能够熟悉单克隆抗体的生产过程和技术要点，并能了解单克隆抗体生产的应用前景。