其他动物病病毒

第四节　 其他动物病病毒

一、牛病毒性腹泻病毒（Bovine viral diarrhea virus, BVDV）

BVDV引起牛的急性疾病称为牛病毒性腹泻，慢性持续感染称为黏膜病，该病在世界范围内流行。

（一）主要特性

BVDV为黄病毒科瘟病毒属成员，病毒粒子呈球形，直径为50～nm，二十面体对称，有囊膜。基因组为单股正链RNA。根据致病性、抗原性及基因序列的差异，将BVDV分为2个种：BVDV1及BVDV2。二者均可引起或导致牛病毒性腹泻和黏膜病，但BVDV2毒力更强。BVDV2与猪瘟病毒抗原性无交叉，BVDV1则有之。后者还可自然感染猪。

BVDV的组织培养宿主范围很广，在胎牛肾、脾、睾丸、气管细胞以及成纤维细胞中均可增殖，某些毒株可产生细胞病变，多数毒株不产生。实验室内常用牛肾继代细胞株（MDBK二倍体细胞株）增殖病毒及制造疫苗。

BVDV对乙醚、氯仿等脂溶剂以及pH 3.0敏感。56℃很快被灭活。

（二）致病性

各种年龄的奶牛、肉牛均易感，但是8～24月龄最常见。黏膜病可突然发病，也可延续数周或数月反复发生，表现为发热、厌食、腹泻、流鼻涕、糜烂性或溃疡性胃炎、脱水等，数周或数月内死亡。从口部直至肠道整个消化道出现糜烂性或溃疡性病灶，是急性病毒性腹泻患牛的特征性表现。

（三）微生物学诊断

1.病毒的分离：急性病例可采集病牛血液、尿、眼鼻分泌物（急性黏膜病具有持续的病毒血症，血液是最好的病毒分离材料），或取脾、骨髓、肠系膜淋巴结等组织，接种MDBK细胞，观察细胞病变，并以间接免疫荧光抗体技术检查细胞培养中的病毒。

2.血清学试验：通常诊断BVDV感染用血清中和试验、ELISA、琼脂扩散试验等检查血清中的抗体。

3.分子生物学检测：通常用RT-PCR扩增检测血清中的BVDV核酸。

（四）防控

做好免疫接种，应用弱毒疫苗对断奶前后数周内牛只进行预防接种。对受威胁较大的牛群应每隔3～5年接种1次，育成母牛和种公牛于配种前再接种1次，多数牛可获得终生免疫。若应用灭活疫苗，可在配种前给牛免疫接种2次。检出持续感染动物并将其从畜群中清除，可预防易感畜群的黏膜病。

二、羊痘病毒

羊痘病毒可感染绵羊或山羊引起羊痘，是所有动物痘病中最为严重的一种。羊痘是OIE规定的通报疫病，我国将其列为一类动物疫病。此外，该病在公共卫生方面也受到密切关注，中国、瑞典、印度都有人类感染羊痘病毒的报道。

（一）主要特性

羊痘病毒是俗称，包括山羊痘病毒（Goatpox virus, GTPV）和绵羊痘病毒（Sheeppox virus, SPPV），属于痘病毒科山羊痘病毒属。在细胞浆内复制，有囊膜，核酸由双股DNA构成。不同的羊痘病毒在血清学上呈交叉反应。成熟的病毒粒子多呈卵形，外层为层管状构造的脂蛋白膜，包围着2个功能不同的侧体以及哑铃型的核酸芯髓。在感染细胞内，可形成胞浆包涵体，多呈椭球形。

羊痘病毒对直射阳光、酸、碱和大多数常用消毒药（酒精、红汞、碘酒、来苏尔、福尔马林、石炭酸等）均较敏感，对乙醚和氯仿也较为敏感。该病毒耐干燥，在干燥的痂皮内能存活数月至数年，在干燥羊舍内可存活6～8个月。不同毒株对热敏感程度不一，55℃ min即可失活。放线菌素-D和溴脱氧尿苷可抑制该病毒复制。

（二）致病性

羊痘病毒是一种亲上皮性的病毒，大量存在于病羊的皮肤、黏膜及痂皮内，病羊血液和鼻黏膜分泌物内也含有该病毒。羊痘病毒在细胞内增殖，且大部分以裸露的形式留在细胞内，为胞内裸病毒，有少部分释放到胞外，成为胞外带衣壳病毒。羊痘感染后出现发热、无毛或少毛部位皮肤黏膜发生丘疹和疱疹，痘疹内充满浆液，形成水泡，进一步破溃、结痂，此外还影响羊的品质，导致孕羊流产，羔羊死亡率高。

（三）微生物学诊断

该病仅感染羊发病，根据临床症状，结合其流行病学特征，即可做出初步诊断。但遇非典型病例，实验室确诊就尤为重要。

1.感染细胞包涵体观察：将病料接种羔羊睾丸细胞单层，当培养至80％的细胞出现病变时，弃去生长液，进行常规HE染色，如果在细胞浆中出现呈圆形、卵圆形的淡紫红色嗜酸性包涵体即可初步诊断。

2.动物回归试验：取收获病毒液离心浓缩后进行绵羊回归试验。选择无羊痘抗体的1～3月龄健康绵羊，羊痘病毒应该在无毛和少毛部位出现红斑、丘疹、结节、水泡，随后皮肤上可见明显的局部性充血并有结膜炎、鼻炎、眼角、鼻腔流黏脓性液体等表现。解剖可见胃黏膜有痘疹分布。

3.ELISA检测：ELISA可检测痘疹或水疱液样品中的病毒抗原。

（四）防控

预防措施包括限制向无该病流行的国家进口病羊，定期进行弱毒疫苗的预防接种。

三、犬瘟热病毒（Canine distemper virus,CDV）

犬瘟热是一种主要危害幼犬的严重犬类疾病，由CDV引起，临床上以呈现双相热型、鼻炎、严重的消化道障碍和呼吸道炎症为主要症状。少数病例可发生脑炎。

（一）主要特性

CDV属于副黏病毒科麻疹病毒属，病毒粒子具有多形性，一般近似球形，直径100～nm。基因组为单负股RNA，不分节段。有囊膜，血凝素（H）和融合蛋白（F）构成囊膜上的两种纤突。犬瘟热病毒的血凝作用与毒株有关。

CDV只有一个血清型，与麻疹病毒和牛瘟病毒具有共同抗原，能够产生交叉免疫。犬和雪貂接种麻疹病毒后对犬瘟热有一定的免疫力。犬瘟热病毒可引起细胞免疫和体液免疫，抗体水平不能完全反映机体的免疫状态。

CDV可在来源于犬、猫、猴、鸡和人的多种原代与传代细胞上生长，但初次培养比较困难。一旦适应某一细胞后，较易在其他细胞上生长，其中以犬肺巨噬细胞最为敏感，可产生细胞病变。犬是常用的实验动物。适应鸡胚的CDV株做鼠脑内接种，可引起鼠神经症状与死亡。

CDV在60℃min、56℃h可失活，在室温下h可使一半以上的病毒失去感染能力。病毒对碱性消毒药敏感，常用的消毒药，如3％氢氧化钠、1％来苏儿、0.1％甲醛溶液均可在几小时内灭活病毒。

（二）致病性

犬瘟热具有高度传染性。CDV对犬致病力最强，在犬、貂、狐等几种动物之间可以相互传染。最常见的急性型有两个阶段的体温升高（双相热），在第二阶段体温升高时伴有严重的白细胞减少症，并有呼吸道症状或胃肠道症状。亚急性型出现神经症状，有永久的神经系统后遗症。

（三）微生物学诊断

病原学检查有病毒分离、电镜观察、荧光抗体染色、RT-PCR等方法。CDV培养比较困难。细胞培养以犬肺巨噬细胞最易成功。

为检查细胞培养物或外周血白细胞与肝、脾、肺等病料中的CDV，国内已建立荧光抗体染色检查法，在被检标本的细胞浆内有特异的荧光斑，即可确诊。用上述标本的冻融液，进行直接负染或加CDV特异血清的免疫电镜观察，可迅速作出诊断。

取犬鼻、眼分泌物、唾液、血清作为检测样本，用胶体金诊断试纸条进行临床犬瘟热病原的检测，该方法在临床广泛使用。

（四）防控

犬瘟热呈世界性分布，可在不同动物种间传播。动物感染后没有特效的治疗药物和方法，采用抗血清、抗菌药物、皮质激素和免疫增强剂等配合良好的护理能降低动物的死亡率。目前常规疫苗保护犬瘟热灭活疫苗、麻疹病毒异源苗和犬瘟热弱毒疫苗，可对不同种类和年龄的动物选择使用，但都存在抗原性差或免疫力不持久等不足。

四、犬细小病毒（Canine parvovirus,CPV）

犬细小病毒病是犬的一种具有高度接触性传染的烈性传染病，病原为犬细小病毒2型（CPV2）。由于病毒的高度稳定性，同时存在着大量易感的犬群，所以犬细小病毒病在全世界大流行。

（一）主要特性

CPV属于细小病毒科细小病毒属，病毒粒子较小，直径nm，呈20面体对称，无囊膜。核酸为线状单股DNA。编码三种结构蛋白VP1、VP2、VP3，其中VP2是其保护性抗原；编码两种非结构蛋白NS1和NS2。犬细小病毒变异株的出现主要与VP2蛋白氨基酸位点发生改变有关。

犬细小病毒与猫细小病毒、貂细小病毒有密切关系，能够产生交叉免疫和血清学的交叉反应。与猪和牛细小病毒关系较远。

CPV能在多种不同类型的细胞内增殖，通常用MDCK和F81等传代细胞进行分离培养。病毒在F81细胞上形成明显的细胞病变，表现细胞脱落、裂解等；在MDCK细胞上形成的CPE不明显，有时出现细胞圆缩，并常形成核内包涵体。

本病毒对外界环境有较强的抵抗力。在室温下能存活3个月，56℃存活h。该病毒对乙醚、氯仿、醇类有抵抗力，对紫外线、福尔马林、次氯酸钠和氧化剂敏感。

（二）致病性

CPV主要感染犬，尤其幼犬，传染性极强，死亡率也高。临床上以呕吐、腹泻、血液白细胞显著减少，出血性肠炎和严重脱水为特征。

（三）微生物学诊断

犬细小病毒胶体金诊断试纸条普遍用于临床诊断该病。取犬粪便经稀释后进行检测。

血清学反应多用ELISA，该手段技术成熟，检出率高。

（四）防控

目前国内主要采用灭活苗和犬五联弱毒疫苗对犬进行免疫。

五、兔出血症病毒（Rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV）

兔出血症病毒俗称兔瘟病毒，可引起家兔及野兔出血性败血症，是一种急性、热性、败血性传染病。

（一）主要特性

RHDV属嵌杯病毒科兔病毒属，为二十面体对称结构，无囊膜，病毒大小为30～nm。在病毒粒子表面有32个杯状凹陷。RHDV只有1个血清型。病毒对绵羊、鸡、鹅和人的O型红细胞有凝集作用，对其他多种动物红细胞无凝集作用。

病毒基因组为线状正链单股RNA。RNA具有感染性，病毒在胞浆内复制。RHDV由一个ORF编码一个聚合蛋白，而后裂解并加工成结构蛋白和非结构蛋白。

RHDV的体外培养较难。该病毒不能在鸡胚上增殖，不能在原代或传代细胞中稳定增殖，至今还没有一种能够使其长期稳定传代的细胞。

病毒对乙醚、氯仿等有抵抗力，能耐受pH3和50℃min处理；病毒对紫外线、日光、热敏感。

（二）致病性

本病潜伏期2～d。由于发病比较急，病死兔一般营养状况良好，临床主要表现为精神沉郁，体温升高，呼吸困难，死前哀鸣、抽搐，死后呈角弓反张，约20％的病死兔鼻孔流出泡沫样血液。

（三）微生物学诊断

根据发病特点和病理变化可做出初诊。进一步确诊可结合实验室诊断，用红细胞凝集试验和红细胞凝集抑制试验，亦可通过中和试验和RT-PCR方法作出诊断。

1.电镜检查：采病死兔肝、脾、肾和淋巴结等材料制成10％悬液，应用超声波处理，经差速离心或密度梯度离心纯化后，制备电镜标本，用2％磷钨酸染色，电镜观察。若检出形态相似的病毒，可初步确诊。

2.血清学检查：用人的红细胞（各种类型均可）作血凝（HA）试验和血凝抑制（HI）试验。若能凝集红细胞，且血凝性可被特异抗血清所抑制，证明本病毒存在。

3.动物试验：采取病死兔的肝、脾或肺，制成1∶5～1∶10悬液，接种非免疫成年兔，可成功复制本病。由于RHDV不能在体外培养系统中进行传代增殖，无法在组织细胞水平进行病毒的中和试验，可用抗RHDV高免血清在实验兔上进行中和试验，以确诊本病。

（四）防控

由于RHDV在体外组织细胞的培养方法尚未建立，目前广泛使用的疫苗为组织灭活苗，一般在接种后d产生血凝抑制抗体。铝胶苗的免疫期可达8～10个月，油佐剂疫苗的免疫期可达1年以上。

【复习思考题】

1.阐述痘病毒的特征。

2.鸡马立克病病毒的致病特点如何？临床如何诊断？

3.如何区分新城疫病毒的毒力？介绍鸡新城疫病毒的常规诊断方法。

4.禽流感病毒的特点是什么？什么是高致病性禽流感病毒？如何检测和控制禽流感？

5.简述禽传染性支气管炎病毒的诊断方法。

6.简述口蹄疫病毒的危害性。如何鉴别口蹄疫病毒野毒感染与疫苗接种？

7.牛病毒性腹泻病毒的抗原性有何特点？

8.简述羊痘病毒的致病特点。

9.阐述犬瘟热病毒和犬细小病毒是如何诊断和防控的？

10.兔出血症病毒的诊断方法有哪些？

11.狂犬病的诊断方法有哪些？如何防控？

12.朊病毒有哪些主要的生物学特性？比较分析PrP^sc和PrP^c的主要异同。

13.试述猪瘟病毒的检测方法。

14.阐述猪繁殖与呼吸综合征病毒的致病特点及检测方法。

15.简述鸡传染性法氏囊炎的发病机理及检测方法。

16.试述禽白血病/肉瘤病毒的亚型及致病性。

17.引起猪繁殖障碍的病毒有哪些？其核酸有何区别？分别应如何诊断？