【摘要】：病毒的分离是诊断病毒感染最精确的方法，但由于病毒仅在活细胞内繁殖，因此病毒的分离需要进行细胞培养或实验动物培养，操作较复杂。为了成功地分离培养病毒，必须恰当地采集和运送标本。由于每种病毒都有各自合适的生长条件，因此需选择适宜的细胞培养种类进行病毒分离，以避免假阴性的实验结果出现。用于识别病毒增殖的方法有多种，其中致细胞病变作用最为方便，可在光学显微镜下观察。
病毒的分离是诊断病毒感染最精确的方法，但由于病毒仅在活细胞内繁殖，因此病毒的分离需要进行细胞培养或实验动物培养，操作较复杂。以下简单介绍细胞培养方法。
（一）标本的采集和运送
为了成功地分离培养病毒，必须恰当地采集和运送标本。应于发病数日内，用灭菌拭子擦取或刮取病变角膜上皮细胞，置Hank′s液内，无菌条件下将拭子揉洗后加抗生素置4℃1h灭菌处理，低速离心后取上清液接种。需远距离运送的标本在运送途中必须保证低温和无菌。
（二）细胞培养分离病毒
由于每种病毒都有各自合适的生长条件，因此需选择适宜的细胞培养种类进行病毒分离，以避免假阴性的实验结果出现。细胞培养一般分为3种类型：
1．原代细胞 如RK细胞（来源于兔肾）、PMK细胞（来源于猴肾）或人来源的组织中分离的细胞，仅传1代或2代。
2．二倍体细胞 如人胚肺成纤维细胞（HEL细胞）或HDF细胞（来源于人新生儿包皮），可传20～50代。
3．异倍体细胞系 自人或动物肿瘤组织建立的传代细胞，如HEp-2细胞（来源于人喉癌）或HeLa细胞系（来源于人子宫颈癌），可无限传代。
常用的分离病毒的细胞选择：单纯疱疹病毒—RK、HDF细胞，水痘-带状疱疹病毒—HDF、HEp-2细胞，巨细胞病毒—HDF细胞，腺病毒—HEp-2细胞。
用于识别病毒增殖的方法有多种，其中致细胞病变作用最为方便，可在光学显微镜下观察。如疱疹病毒感染的细胞变圆、增大、细胞融合为多核巨细胞，腺病毒感染的细胞变圆、聚合成葡萄状。此外还可通过观察红细胞吸附、干扰现象、空斑形成等识别病毒增殖。最后还要对所分离的病毒进行鉴定，包括血清学试验及电子显微镜法鉴定病毒形态。
免责声明：以上内容源自网络，版权归原作者所有，如有侵犯您的原创版权请告知，我们将尽快删除相关内容。
