卵细胞和中央细胞的培养

合子培养直到20世纪90年代才有报道，但其发展最为迅速，技术最为完善，并已再生可育植株，随培养技术的不断改进，将会有更多植物的合子培养获得成功。卵细胞离体培养的结果不理想，还需深入研究。中央细胞的培养已有了良好基础并在个别植物上取得了成功。

1）合子培养

各种植物的合子在分离方法、培养方法、培养条件、培养时发生的细胞学变化、发育过程和发育途径等方面均有差异。

目前，唯一一例离体融合产生的合子培养获得再生杂种植株是在玉米中实现的。研究表明，从离体受精到植株开花约需100天，形成的籽粒具有正常发育的胚和胚乳（见图4.6）。

图4.6　玉米人工合子再生植株流程

2）卵细胞培养

卵细胞的培养相对困难，但在外力的刺激和适当的条件下，卵细胞具有不经受精即启动胚胎发育的潜能，这将有助于在人工控制的条件下开展卵细胞的激活、分裂及孤雌生殖等相关研究，同时，作为单倍体的卵细胞，如能培养成功，可直接获得单倍体植株，将为遗传转化和作物改良提供优良的实验体系。

3）中央细胞的培养

从水稻中分离的中央细胞多数呈球形，细胞质、细胞器、细胞核、大液泡和内含物等呈极性分布。由于中央细胞体积较大，易于分离出多个亚中央细胞，因此，分离时须细心操作。

水稻受精后的中央细胞培养10～12 h后，细胞质逐渐增加，小液泡增多，大液泡体积减小。培养1～2天后，核分裂为多个游离核，位于细胞外周。培养3～4天后，有些中央细胞分裂为2个细胞，胞质和核位于分裂面，细胞呈椭圆形。

合子和中央细胞培养技术的建立使在人工控制条件下研究被子植物双受精及早期胚胎发育的机理成为可能，它将为卵的激活、精卵识别、合子形成、极性分布、不均等分裂、胚胎细胞分化和器官发生等受精和胚胎发生的细胞生物学及分子生物学研究提供良好的实验体系。