1.2.1 材料预处理
将采摘的刺葡萄嫩叶用自来水清洗，再用蒸馏水清洗几次，正常干燥。
1.2.2 基因组DNA提取
1.2.2.1 试剂的配制
试剂1：高盐TE buffer ：10mmol/L TrisHCl（ PH8.0 ）， 1 mmol/L EDTA（ pH8.0）， 100mmol/L NaCl。
试剂2： CTAB抽提液：2%（m/V） CTAB， 100 mmol/L Tris·HCl（pH8.0）， 20mmol/L EDTA（ pH8.0 ）， 1.4mol/L NaCl（使用前预热并加2%2-硫基乙醇），后加入2%PVP。
试剂3： 70%乙醇：用100 mL量筒量取70 mL100%的乙醇倒入100 mL容量瓶中，25℃加去离子水定容。
试剂4： CTAB/NaCl溶液：在40 mL水中溶解2.05 g NaCl，缓缓加入5 g CTAB并搅拌，置于65℃水浴锅加热至全部溶解。
试剂5：氯仿/异戊醇抽提液：氯仿，异戊醇（体积比24∶1）。
1.2.2.2 基因组DNA提取
（1）将1g材料（新鲜嫩叶）放入研钵中在-20℃冷却1h，然后快速研磨成粉状。
（2）将粉末放入50 mL离心管中，加入10～15 mL CTAB抽提液，60℃水浴50min，再加入100µL5mol/L NaCl和80µL CTAB/NaCl溶液60℃水浴10min。
（3） 4000rpm离心5min，然后将液相分装到1.5mL离心管（每管大约600µL）。
（4）加入1体积氯仿/异戊醇，混合5min， 13000rpm离心20 min。
（5）取上清，加入1体积氯仿/异戊醇，混合5min， 13000rpm离心20min。
（6）转上清，加入0.6体积-20℃预冷异丙醇， -20℃沉淀DNA 10～30min。
（7） 2700g（g为重力加速度）离心2 min，移除液相。
（8） 70%乙醇洗涤，重复（7），倒扣离心管于滤纸上1h，然后室温或37℃干燥。
（9）用50µLTEbuffer重悬DNA，加入1µL RNase37℃水浴2h（或更长），-20℃冰箱保存或立即做琼脂糖凝胶电泳。
1.2.3 电泳检测
凝胶制备：称取0.6g琼脂糖，放入锥形瓶中，加入100mL0.5×TBE缓冲液，置微波炉加热至完全融化，取出摇匀。待凝胶冷却到60℃时，摇匀缓缓倒入有机玻璃内槽，直到有机玻璃板上形成一层均匀的胶面（不能有气泡）。待胶液凝固后，将有机玻璃槽取出放入电泳槽内。加入电泳缓冲液至电泳槽中使电泳液刚好没过胶面，轻轻取出梳子。
加样：从每个DNA样品中取5 µL，每个加入1µL6×Loading-buffer，使其与DNA样品充分混合。用移液枪将DNA样品加入加样孔（记录点样顺序）。
电泳：接通电泳槽与电泳仪的电源，电泳电压为100V。当溴酚蓝染料移动到凝胶中间时，停止电泳。取出凝胶，置于0.5 µg/mL的EB染液中，室温染色15 min。用去离子水漂洗后放入凝胶成像仪观察。
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