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三疣梭子蟹个野生群体遗传差异的同工酶分析

时间:2022-02-09 理论教育 版权反馈
【摘要】:对其遗传特性的研究仅仅在近一二年有一些工作,不同群体生化遗传方面差异的研究尚未见报道。因此,本书采用聚丙烯酰胺不连续凝胶垂直电泳技术对三疣梭子蟹4个野生群体的同工酶进行检测,分析群体间的生化遗传差异,以期为三疣梭子蟹地理种群的识别、亲缘关系、种质资源保护和遗传育种提供数据支持。三疣梭子蟹4个群体的样品于2005年10月中旬分别取自:丹东鸭绿江口、渤海莱州湾、连云港海州湾、浙江舟山群岛。

由于三疣梭子蟹(P.trituberculatus)具有独特的经济价值,因此自20 世纪50年代起国内有关三疣梭子蟹的养殖习性、生理生态、胚胎发育等方面的研究较多,迄今三疣梭子蟹仅限于人工苗种培育、人工养殖方法研究。对其遗传特性的研究仅仅在近一二年有一些工作,不同群体生化遗传方面差异的研究尚未见报道。因此,本书采用聚丙烯酰胺不连续凝胶垂直电泳技术对三疣梭子蟹4个野生群体(鸭绿江口、莱州湾、海州湾、舟山)的同工酶进行检测,分析群体间的生化遗传差异,以期为三疣梭子蟹地理种群的识别、亲缘关系、种质资源保护和遗传育种提供数据支持。

三疣梭子蟹4个群体的样品于2005年10月中旬分别取自:丹东鸭绿江口(YL)、渤海莱州湾(LZ)、连云港海州湾(HZ)、浙江舟山群岛(ZS)。每个群体各48只。活体解剖取适量肌肉组织,编号,迅速放入-70℃保存。同工酶电泳采用不连续聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳。对凝胶浓度、电压、电极缓冲液、点样量的多少和染色条件进行摸索和优化,最终确立电泳参数。凝胶浓度(T):T浓缩胶5 3.6%(pH6.7),T分离胶5 8.2%(pH8.9);电压:Tris-甘氨酸(TG,pH 8.3)系统,恒压280 V;电泳时间5-7 h,点样量视不同种酶类而异。从所做的17种同工酶中选出显带清晰的11种同工酶用于常规的分析。

同工酶的缩写、基因座位和等位基因的命名基本参照Shaklee等(1990)和Whitmore(1990)方法。以同工酶缩写的名称的大写代表酶蛋白,小写代表编码基因。控制同一种酶的不同基因座位按照从阳极到阴极的顺序依次标记为1、2、3…,同一基因座位的不同等位基因按照从阳极到阴极的顺序依次标记为a、b、c…。采用王中仁(1998)和曾呈奎(1998)的数理统计方法。

表8 三疣梭子蟹11种同工酶及电泳情况

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