三疣梭子蟹个野生群体非特异性免疫酶活的比较

近年来，由于种质资源的破坏、养殖环境的污染等因素损害了三疣梭子蟹免疫防御系统，导致自身的免疫抗病力下降，疾病频繁发生，因此有必要对我国不同地域的三疣梭子蟹资源进行系统的研究，开发出各方面品质都较优良的品种，带动三疣梭子蟹养殖业发展。有关三疣梭子蟹种质方面的研究报道很少，其中高保全等（高保全等，2007）用聚类分析、判别分析发现海州湾、舟山2个群体形态最为接近，鸭绿江口和莱州湾2个群体形态较为接近，这说明我国三疣梭子蟹不同群体中，必然存在养殖生产和遗传选育可以利用的种质差异，因此为了系统地研究三疣梭子蟹的不同群体种质遗传特性，本书以海州湾、舟山、鸭绿江口和莱州湾4个野生群体的三疣梭子蟹为试验材料，探讨不同群体的三疣梭子蟹在免疫功能上的差异，为科学地开发、利用和保护三疣梭子蟹种质资源，促进抗逆品种的选育提供科学依据。

采集海州湾、舟山沿海、辽东湾、莱州湾4个地理群体的野生三疣梭子蟹饲养于潍坊昌邑养殖实验基地，于2007年5月～6月进行孵化，选择养殖条件一致的蟹池进行饲养，采用随机区组设计，每个群体4个养殖池，2007年11月从各群体随机取健康蟹20只（每个群体每个养殖池取5只）用于试验，体重平均为168.5.6　27.4g。用注射器从试验蟹第三或第四步足基部取血淋巴，迅速放入液氮中保存，回实验室后冷冻高速离心吸出血清待测。分别迅速取试验蟹的肌肉和肝胰腺液氮冷冻保存，测定时取组织样称重，肌肉和肝胰腺样品分别加入3.5倍和10倍的0.1mol/L磷酸钾盐缓冲液（pH6.4），低温匀浆、离心（4℃，5.0.0　rpm，10min），取上清液用于酶活测定。试验数据采用SAS 的GLM方差分析程序进行均值多重比较，采用Duncan氏法进行，以P , 0.05表示差异显著。