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共聚焦技术Ⅱ

时间:2022-07-01 百科知识 版权反馈
【摘要】:共聚焦显微技术的应用范围包括形态学观察与测量、生物学测量、蛋白质功能检测及其他光谱测量。此外,还可以对药物进入细胞的动态过程进行定位分布及定量。除了可以对固定标本的细胞进行观察外,共聚焦显微技术还可以获得活细胞内的信息,显示在活体情况下细胞内的真实结构和生理学特征。

共聚焦显微技术的应用范围包括形态学观察与测量、生物学测量、蛋白质功能检测及其他光谱测量。生物学测量方面分为动态与静态的生物学测量,可以在动态与静态水平同时检测活细胞或组织内游离离子分布和浓度的变化(Ca2+、Mg2+、Na+、K+等)、自由基的动静态水平、线粒体膜电位的动静态变化及蛋白质的转位(静态测量时需用固定样品)。此外,还可以对药物进入细胞的动态过程进行定位分布及定量。蛋白质功能检测可分为蛋白荧光恢复的测量(Fluorescence recovery after photobleaching,FRAP)与荧光漂白丢失(Fluorescence loss in photobleaching,FLIP)、笼索解笼索的测量与动态/静态兼可的荧光能量共振转移(Fluorescence resonance energy trangfer,FRET)三种测量方式。

除了可以对固定标本的细胞进行观察外,共聚焦显微技术还可以获得活细胞内的信息,显示在活体情况下细胞内的真实结构和生理学特征。更为重要的是利用共聚焦显微镜可以跟踪自然状态下或受某种因素刺激后活细胞内的结构和生理过程随时间变化的情况,得到准确而直观的动态变化资料,为分析细胞内的病理生理反应提供直接的实验数据。

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