人类红细胞表面有多种抗原系统，对证明骨髓的植入是较为有效的标记物。但需要注意的是由于红细胞在外周血中的寿命约120d，因此在骨髓移植的前后4个月左右，受者若有非相关供者输血史则不建议以红细胞血型抗原为监测指标，易导致判断错误。
（一）ABO血型检测
ABO血型是最早发现的红细胞表面抗原，其基因位于9号染色体上，A基因表达A抗原，B基因表达B抗原，H基因表达的非A非B。ABO血型的不合分为主要的不合及次要的不合。前者是指供者红细胞具有受者所没有的抗原，可被受者血浆中的抗体所对抗；后者指供者血浆中有对抗受者红细胞的抗体。主要的血型不合可作为造血干细胞移植的植入证据。在移植后待血象恢复到一定水平，对患者的ABO血型进行追踪观察。
【原理】 红细胞根据其表面凝集原的不同分为O，A，B及AB四种血型。用标准抗血清检查可判定红细胞的血型。
【试剂】
1.A，B和O型标准血清。
2.生理盐水。
【仪器】
1.试管数支。
2.滴管、玻璃棒各一支。
3.清洁玻片或白瓷板一块。
【操作方法】
1.玻片法
（1）取试管1支，加生理盐水1ml，加入受检者血液3～5滴，混匀后即为3%～5%的红细胞悬液。
（2）取清洁玻片或白瓷板一块，分别滴加A，B，O标准血清1滴。
（3）在三种血清滴上各加5%红细胞生理盐水悬液1滴。将玻片（或白瓷板）不断轻轻转动（在室温18～22℃），使血清与细胞充分混匀连续约15min，以肉眼观察有无凝集反应。如以玻片试验时，也可用低倍镜观察凝集结果（表12-4）。
2.试管法
（1）取3支试管，做好标记，分别加入A，B，O三种血清各1滴，再各加5%红细胞悬液1滴，混合后，以1 200r/min离心1min，转动试管，观察凝集结果（表12-4）。
表12-4 用标准血清判ABO血型
（2）结果判断，对照上表，以凝集情况判断被检者血型。
【注意事项】
1.骨髓移植前检查供、受者ABO血型，如果供、受者血型为主要不合，而在骨髓移植后检查受者的血型演变为供者型别，则证明供者骨髓已在受者体内植活。
2.对于有多次输血史的患者，结果需要做一定的分析。
（二）Rh血型检测
Rh血型的不合主要表现为Rh血型抗原的阴性和阳性，其主要抗原为C、c、D、E、e，带有D者为Rh阳性，不带D者为Rh阴性。
【原理】 Rh血型的抗血清有抗C、抗D、抗E、抗c及抗e五种。用该五种抗血清可将Rh血型系统分为18个型别，单用抗D血清只能定为Rh阴性或Rh阳性。抗D血清若为完全抗体，可用盐水法检查Rh血型；若为不完全抗体，则需用木瓜酶法检查。
【试剂】
1.盐水法
（1）抗D（完全抗体）血清。
（2）生理盐水。
2.木瓜酶法
（1）抗D（不完全抗体）血清。
（2）健康人AB血清。
（3）1%木瓜酶试剂：①木瓜酶2g，加少量磷酸盐缓冲液（PBS），研磨，加磷酸盐缓冲液至100ml，低温下用滤纸过滤二三次至澄清液。②取1mol/L半胱氨酸溶液5ml与1mol/L氢氧化钠溶液5ml混合，调节pH值至7.0。③于木瓜酶液（100ml）中加入pH为7.0的上述液，再加入磷酸盐缓冲液至200ml，置4℃冰箱中，可立即鉴定。
（4）已知D阳性红细胞。
（5）生理盐水。
【仪器】
1.试管数支。
2.37℃水浴锅。
【操作方法】
1.盐水法
（1）在加有1ml生理盐水的试管中滴入受检者血液5滴即为5%红细胞生理盐水悬液。
（2）再取1支试管，滴加抗D标准血清及受检者5%红细胞生理盐水悬液各1滴。混匀后置37℃水浴中1h。
（3）从水浴中取出试管，并倾斜转动，观察凝集结果。凝集者为Rh阳性，不凝集者为Rh阴性。
2.木瓜酶法
（1）取3支试管，分别标注为检测管、阳性及阴性对照，分别加入抗D血清、不完全抗D血清和健康人AB血清1滴。
（2）检测管、阳阴性对照管分别加入5%受检红细胞生理盐水悬液、5%已知D阳性红细胞生理盐水悬液1滴及木瓜酶试剂各1滴，混匀。
（2）三管均放在37℃水浴中保温20min。
3.结果判断 如阳性对照凝集，阴性对照不凝集时，样品管凝集，表示受检红细胞为Rh阳性（有D抗原），不凝集为Rh阴性（无D抗原）。
【注意事项】
1.骨髓移植后检查受者血型，如果ABO血型是受者的血型，则需进一步检查Rh的型别。如果Rh型别与供者的型别相同，则同样证明供者的骨髓在受者体内已植活。
2.除检测D抗原外，必要时还需检测Rh的其他型别，即按上述方法用抗C、抗c、抗E和抗e血清检查红细胞上的C、c、E、e抗原。
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