空肠弯曲菌

五、空肠弯曲菌

1973年Sebald等发现该菌不发酵葡萄糖，DNA的组成及含量不同于弧菌属，为了区别于弧菌而建立弯曲菌属（Campylobacter）。与食源性相关的空肠弯曲菌肠炎（campylobacter jejuni enteritis）是由空肠弯曲菌引起的急性肠道传染病。

1．常规分离鉴定技术

（1）大便常规：外观为黏液便或稀水便。镜检有较多白细胞，或有较多红细胞。直接涂片检查可见细小、单个或成串，海鸥翼形、S形、C形或螺旋形两端尖的杆菌为阳性。方法见《全国临床检验操作规程（1997年）》。

（2）细菌学检查：可取患者大便，肠拭子或发热病人的血液、穿刺液等为检材，用选择培养基，在厌氧环境下培养，分离病菌按照《全国临床检验操作规程，1997年》方法进行。食品、水等相关食源性标本检测按照GB／T4789．9-2003方法进行。若具有典型的菌落形态及特殊的生化特性即可确诊。

（3）血清学检查：取早期及恢复期双份血清做间接凝血试验，抗体效价呈4倍或以上增长，即可确诊。发病一周后，血清内可出现抗体，主要为lgM，可用间接血细胞凝集试验及间接免疫荧光试验等检测特异性抗体效价，正常人或带菌者血清效价可达（1∶2～1）∶8，急性期病人抗体效价可达1∶8～1∶32，恢复期可达1∶80～1∶320以上。由于血清抗体效价不高，须采取双份血清检测，以效价增高4倍作为诊断依据。

2．流行病学调查分型技术

（1）血清型分型技术：本菌抗原构造与肠道杆菌一样具有O，H和K抗原。根据O抗原，可把空肠弯曲菌分成45个以上血清型，第11，12和18血清型最为常见。血清学分型方法可采用被动血细胞凝集法和玻片凝集法。被动血细胞凝集试验与玻片凝集各有不同的分型抗血清组成。由于分型血清供应问题，血清分型有时难于实现。

（2）分子流行病学分型技术

1）脉冲场电泳分型：Fitzgerald在对堪萨斯州盐湖城的一所学校暴发的空弯菌病的调查中，用PFGE对流行病学资料进行初步确认。并比较了其他亚型分型方法的能力，这些分型技术包括：血清学分型法、鞭毛蛋白基因（flaA）的PCRRFLP分型、flaA基因582bp片段序列分析、整个鞭毛蛋白基因测序分析。与这些技术相比，PFGE对菌株分辨力最高，在此次空肠弯曲菌病暴发的调查中起着关键的作用。

2）扩增片断长度多态性和限制片断长度多态性分型：Sammarco等用AFLP，RFLP，生物分型和抗药性分析方法对空肠弯曲杆菌进行分子分型。通过对18株空肠弯曲杆菌的flaA基因进行AFLP和RFLP分析，将分析结果和其表型分型（生物分型和抗药性分析）结果相比较。AFLP分辨力高，结果重复性好，适用于对从不同的暴发疾病中的菌株的区分；RFLP分析仅对同次疾病中的菌株比较非常有用。

3）随机扩增多态DNA分型：为确定空肠弯曲杆菌食品污染的来源，调查了零售的肉类、鸡肉处理工厂和孵育农场。在禽类处理工厂，发现在宰杀后的鸡体上、仪器上以及工人的手上均存在明显的空肠弯曲杆菌污染，随机扩增多态性DNA分析显示空肠弯曲杆菌污染源于肠组织。两个星期后，该农场所有家禽均呈空肠弯曲杆菌阳性，随机扩增多态性DNA分析再次显示，空肠弯曲杆菌在农场的不同群体之间迅速蔓延。