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弯曲菌属和幽门螺杆菌及其检验

时间:2022-03-16 理论教育 版权反馈
【摘要】:血液或脑脊液标本经增菌后,粪便和肛拭子标本直接接种于选择培养基,可疑菌落进行鉴定。生化反应不活跃,为氧化酶、触酶、DNA酶均阳性,快速脲酶试验强阳性。标本采集多部位采集胃、十二指肠黏膜标本,放入20%葡萄糖运送液或无菌生理盐水中立即送检,4℃保存不超过5h。幽门螺杆菌主要引起消化性溃疡、慢性活动性胃窦炎等,长期感染易发展为萎缩性胃炎、胃腺癌和胃黏膜淋巴组织淋巴瘤。

(一)弯曲菌属

本属细菌为革兰阴性无芽胞的弯曲短杆菌,呈S状或逗点状等,一端或两端各有一根鞭毛,暗视野显微镜下呈投镖式或螺旋式运动。微需氧菌,最适生长环境是5%O2、10%CO2和85%N2。本属菌最适生长温度随菌种而异。空肠弯曲菌、大肠弯曲菌在43℃生长;胎儿弯曲菌在25℃生长;简明弯曲菌在25℃和43℃均不生长;但各种菌在37℃皆可生长。营养要求高,培养基需加入血液、血清才能生长,为抑制肠道正常菌群的生长,培养基大多含有抗生素(主要为头孢哌酮),出现沿接种线扩散生长或单个细小两种菌落,均不溶血。生化反应不活泼,氧化酶和触酶阳性,可还原硝酸盐为亚硝酸盐,不分解和不发酵各种糖类,不分解尿素。抗原有菌体(O)抗原、热不稳定抗原和鞭毛(H)抗原。抵抗力弱,但耐寒。

标本采集后应立即送检或将标本接种于卡-布运送培养基中送检。标本直接检查:①动力检查:悬滴法;②染色标本检查:革兰和鞭毛染色。血液或脑脊液标本经增菌后,粪便和肛拭子标本直接接种于选择培养基,可疑菌落进行鉴定。在选择培养基上能生长,氧化酶阳性、革兰染色阴性、弯曲呈S形或螺旋形的细菌可初步鉴定;其余鉴定试验有:生长温度(25℃、37℃、42℃)、马尿酸盐水解、硝酸盐还原、硫化氢试验等。

弯曲菌广泛分布于动物界,主要引起动物和人类的腹泻、胃肠炎和肠道外感染。

(二)幽门螺杆菌

幽门螺杆菌(Hp)为革兰阴性,呈螺旋形、S形或海鸥状弯曲,菌体一端或两端可有多根带鞘鞭毛。微需氧菌,在潮湿(相对湿度98%以上)、37℃、5%O2、85%N2、10%CO2的条件下生长良好,营养要求较高,培养基需加入血或血清,为抑制杂菌培养基中添加抗菌素。25℃不生长、42℃少数生长,生长缓慢。生化反应不活跃,为氧化酶、触酶、DNA酶均阳性,快速脲酶试验强阳性。Hp对酸敏感,但与其他细菌相比有一定的耐酸性,尿素对Hp可起到保护作用,1%胆盐可抑制Hp生长。

标本采集多部位采集胃、十二指肠黏膜标本,放入20%葡萄糖运送液或无菌生理盐水中立即送检,4℃保存不超过5h。标本显微镜检查:①直接镜检:取胃、十二指肠黏膜活检标本做革兰染色镜检;②组织学切片。快速检查:①快速脲酶试验;②放射性核素标记试验(14C呼吸试验);③PCR。用选择性培养基培养,可疑菌落做生化鉴定,触酶、25℃生长、43℃生长、3.5%NaCl和脲酶五项试验为(+---+)。

幽门螺杆菌主要引起消化性溃疡、慢性活动性胃窦炎等,长期感染易发展为萎缩性胃炎、胃腺癌和胃黏膜淋巴组织淋巴瘤。

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