毒物鉴定方法

时间：2022-04-06 理论教育版权反馈

【摘要】：为确证砷、汞，将上述变色铜片，用蒸馏水冲净并用滤纸吸干后，置于一干燥中间呈毛细管状并一端封口的小玻璃管中，手执上端，以小火小心加热其底部，至铜片完全成为红色氧化铜。将此残渣按以下方法鉴定。取残渣少许，加水适量溶解，煮沸2min灭菌，冷后注射于青蛙，如有河豚毒素存在，青蛙呈麻痹状态，最后呼吸麻痹而死。用样品的水溶液养小鱼，观察24～72h内小鱼的生活状况，如小鱼正常生活，表示该植物不致引起急性中毒。

（一）化学鉴定法

1．生物碱的测定

（1）取样品1～2g，捣碎后加入1%醋酸，加热，过滤，即为样品的醋酸溶液，将滤液放在黑色瓷板上，加几滴试液，如有白色或黄色沉淀物，可能有生物碱存在。（试液配制法：取1．5g氯化汞和5g碘化钾，分别溶于60ml与10ml水中，然后混合两液，加水稀释至100ml。）

（2）将碘0．5g和碘化钾1．5g共溶于250ml水中。此试剂能自酸性溶液中使多数生物碱完全沉淀，沉淀多为棕色。

2．氰苷的测定（氢氰酸）　取样品1～2g加入1%醋酸，加热，过滤，滤液即为供试品，置试液于试管中，加入10%氢氧化钠几滴及新制的5%硫酸亚铁溶液几滴（加硫酸亚铁结晶体2～3粒也可以）加热至沸，冷却后加入10%三氯化铁溶液几滴，再加10%盐酸，如呈现蓝色，证明有氰苷。

3．强心苷的测定　取样品浸入24%乙醇中，在水浴上加热约30min取乙醇提取液5ml加饱和醋酸铅水溶液10～15滴，待沉淀（如沉淀不完全，继续加饱和醋酸铅），摇匀，再加饱和硫酸钠溶液10～20滴以除去过量的醋酸铅，用棉球过滤，除去沉淀，将滤液分放在2支试管中，做下列测定：

（1）加试剂3～5滴摇匀5～10min或在50℃左右水浴上加热2min，如呈现橘红或橙红色，表示有强心苷（试剂配制法：饱和苦味酸水溶液9份加10%氢氧化钠溶液1份）。

（2）加另一试剂3～5滴，如呈现樱桃红色，表示有强心苷。（试剂制备法：2%3－5－二硝基苯甲酸醇溶液1ml，加40%氢氧化钠水溶液3ml，再加水7ml）。

4．皂苷的测定　取脱纤维血液1ml，加入作强心苷测定的浸液数滴，如血液变为透明，即是溶血作用，说明有皂苷存在。

5．其他苷类的测定　取样品1～2g，加入无水乙醇5ml，在水浴上加热约30min，过滤，取滤液2ml，加入10%α－萘酚2滴，摇匀，然后沿管壁慢慢加入浓硫酸0．5ml，如有紫色浑环出现，表示含皂苷。

6．砷、汞、锑的测定　取样品适量或尿50ml，加氯化亚锡结晶少许，并加盐酸至2%～8%，摇匀加热10min，放入用硝酸和蒸馏水洗过的纯铜片2块，煮沸30min，如铜片变色，即根据铜片变色情况，分析可能存在的金属毒物。铜片如变灰黑色，表示可能存在砷化物（灵敏度0．005mg／20ml）；如变褐紫色，表明有锑化物存在（灵敏度0．02mg／20ml）；如变银白色，表示汞化物存在（灵敏度0．05mg／20ml）；如变黑色则表明有硫化物存在。

为确证砷、汞，将上述变色铜片，用蒸馏水冲净并用滤纸吸干后，置于一干燥中间呈毛细管状并一端封口的小玻璃管中，手执上端，以小火小心加热其底部，至铜片完全成为红色氧化铜。这时砷、汞即挥发至毛细管部分，然后用低倍显微镜观察升华物的形状：砷呈明亮的八面体，汞呈不透明小球。

上述试验，要求操作熟练，升华温度不宜过高，防止溢出或颗粒太少不易识别。玻璃管可用小康氏管代替。正常人尿含砷量0．00～0．10mg／L，发生全身中毒症状的病人尿砷可在达4．16mg／L。本法灵敏，临床诊断上有一定意义。

7．河豚毒素的测定　取胃内容物、呕吐物或切碎的残存食物，在常温下浸渍过滤，滤液内加适当醋酸铅，搅拌后除去沉淀，然后通硫化氢除去剩余的铅，再过滤滴加磷钼酸溶液，使胆碱等物沉淀并过滤，滤液真空干燥，所得残渣用无水乙醇浸渍2次，此无水乙醇不溶的黄色残渣，即为粗制河豚毒素。将此残渣按以下方法鉴定。

（1）取残渣少许，溶于硫酸后加重铬酸钾少许，如为河豚毒素即呈绿色。

（2）取残渣少许，加水适量溶解，煮沸2min灭菌，冷后注射于青蛙，如有河豚毒素存在，青蛙呈麻痹状态，最后呼吸麻痹而死。

8．牛黄的测定　取毒物少许，置试管中，分别加入下列试剂约3ml，微热，有显色反应。

（1）加冰醋酸呈绿色，冷后，小心加入等量硫酸，则下层无色，上层绿色，两层相间处有红色环（甾醇反应）。

（2）加硫酸呈绿色。

（3）加硝酸呈红色。

（4）加氨液呈黄棕色。

（二）简易动物试验法

用样品的水溶液（一般浓度20%～50%）养小鱼，观察24～72h内小鱼的生活状况，如小鱼正常生活，表示该植物不致引起急性中毒。