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对酶活性的影响

时间:2022-10-19 百科知识 版权反馈
【摘要】:酶的活性受环境pH值的影响极为显著。本实验观察pH值对唾液淀粉酶活性的影响,唾液淀粉酶的最适pH值约为6~8。用吸管按表3-2所示顺序和剂量加入0.2mol/L磷酸氢二钠溶液和0.1mol/L柠檬酸溶液以制备pH值为5.0~8.0的4种缓冲液。从4个锥形瓶中各取缓冲液3mL,分别注入4支带有号码的试管中,随后于每个试管中添加0.5%淀粉溶液2mL和稀释200倍的唾液2mL。将各试管内容物混匀,并依次置于37℃恒温水浴中保温。
对酶活性的影响_生物化学实验

三、pH对酶活性的影响

(一)实验原理

酶的活性受环境pH值的影响极为显著。不同酶的最适pH值不同。本实验观察pH值对唾液淀粉酶活性的影响,唾液淀粉酶的最适pH值约为6~8(不同缓冲液中略有变化)。

(二)实验药品、实验设备

1.溶于0.3%氯化钠的0.5%淀粉溶液(现用现配);

2.稀释200倍的新鲜唾液;

3.0.2mol/L磷酸氢二钠溶液;

4.0.1mol/L柠檬酸溶液;

5.碘化钾-碘溶液;

6.pH试纸:pH值分别为5、5.8、6.8以及8的试纸共4种;

7.试管及试管架,吸管,滴管,50mL锥形瓶,恒温水浴。

(三)实验方法

取4个50mL锥形瓶。用吸管按表3-2所示顺序和剂量加入0.2mol/L磷酸氢二钠溶液和0.1mol/L柠檬酸溶液以制备pH值为5.0~8.0的4种缓冲液。

从4个锥形瓶中各取缓冲液3mL,分别注入4支带有号码的试管中,随后于每个试管中添加0.5%淀粉溶液2mL和稀释200倍的唾液2mL。向各试管中加入稀释唾液的时间间隔各为1min。将各试管内容物混匀,并依次置于37℃恒温水浴中保温。

第4管加入唾液2min后,每隔1min由第3管取出1滴混合液,置于白瓷板上,加1小滴碘化钾-碘溶液,检验淀粉的水解程度。待混合液变为棕黄色时,向所有试管依次添加1~2滴碘化钾-碘溶液。添加碘化钾-碘溶液的时间间隔,从第1管起,亦均为1min。

观察各试管内容物呈现的颜色,分析pH对唾液淀粉酶活性的影响。

表3-2 pH对酶活性的影响

(四)实验记录

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