蛋白尿的检测方法

1．尿蛋白定性试验　尿蛋白定性试验只能对尿蛋白程度进行粗略地估计，做此项试验有三种方法：磺基水杨酸（磺柳酸）法、加热醋酸法和试纸法。

（1）磺基水杨酸（磺柳酸）法：这是一种比浊试验，根据浊度以“＋”号表示。本试验比较灵敏，蛋白浓度50毫克／升即可出现阳性反应。

（2）加热醋酸法：原理是加热使蛋白质变性凝固，加酸使尿液酸化利于蛋白析出并使析出的碱性盐类溶解。以浊度“＋”号判断，蛋白质检出的灵敏度为50～100毫克／升。

（3）试纸法：阳性时指示剂由黄色变为红绿色或黄蓝色，颜色愈深表明蛋白质愈多，可以初步估计蛋白量。需要注意的是，普通试纸只能检测清蛋白，如果试纸法检测只有少量蛋白，而酸沉淀法检测有大量蛋白，应警惕有无球蛋白和（或）其轻链造成的蛋白尿。近年来试纸法被广泛地运用，患者可以自测，但应注意的是，在pH超过8的碱性尿中可出现假阳性的结果，在强酸性尿中可出现假阴性的结果。

尿蛋白定性试验结果的表示法：（-）为阴性，（±）为极微量，（＋）～（）表示不同程度的蛋白尿。由于尿蛋白定性试验影响因素较多，如尿量多少、患者活动状态等，因此，尿蛋白定性试验应连续检测3次，均为阳性者需进一步做定量检查。

2．24小时尿蛋白定量试验　尿蛋白定量试验可以准确地测定出24小时尿液中所含的蛋白质的总量。具体留尿方法：晨起弃去第1次尿开始计时，留尿至第2日同一时间（如早6点至第2天早6点），患者要收集24小时的全部尿液，并准确地记录好总尿量，总尿量最好不超过1　500毫升，摇匀尿液后取一小瓶量不少于30毫升的尿液送检。值得注意的是，夏天留尿或留尿至尿液送检时间相隔过长时应加适量的防腐剂。计算时将1　000毫升尿液中所含蛋白质的浓度乘以总尿量，即为24小时排出尿蛋白的总量。如果每日尿蛋白定量＜1．0克为轻度蛋白尿，每日尿蛋白定量在1．0～3．5克为中度蛋白尿，每日尿蛋白量＞3．5克为重度蛋白尿。

3．特殊检查法　尿液中的特殊蛋白浓度很低，因此需要用特殊方法检测。

（1）β2-微球蛋白：β2-微球蛋白是一种低分子量蛋白，常用的检测方法有放射免疫检测法或ELISA法，临床上定期检测尿β2-微球蛋白水平监护重金属接触者的肾损害。

（2）维生素A结合蛋白：维生素A结合蛋白在正常尿液中含量很低，可用ELISA法检测。尿中维生素A结合蛋白水平上升提示肾小管重吸收功能障碍，可作为近端肾小管损伤的标记物，主要见于肾小管间质疾病，但同时有肾小球疾病者尿中维生素A结合蛋白水平不一定与小管间质损伤程度平行。

（3）α1微球蛋白：分子量31kD，在尿中比较稳定，用免疫化学技术可以测定。作为肾小管性蛋白尿的标志，广泛应用于评估近端肾小管损伤，其排泄率随损伤的肾小管上皮的恢复而下降。

（4）转铁蛋白：分子量、直径大小与白蛋白相似，所带负电荷较白细胞少，肾小球滤过膜电荷屏障损伤时更易漏出，在酸性尿中易降解。采用速率散射免疫比浊法检测。

（5）N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶（NAG）：正常尿中含量极微，用比色法检测以单位／尿肌酐（g）表示。尿NAG是肾小管损伤的标志物，其水平上升见于接触毒物或药物致肾毒性损伤和各种肾小球疾病。尿NAG增加主要由于近端肾小管摄取大量蛋白，从而导致溶酶体活化损伤所致。

4．尿蛋白电泳　尿蛋白电泳用于尿液蛋白各成分分离和半定量测定，区别尿蛋白的分子量，从而了解尿蛋白的形成原因和病变部位，是诊断和鉴别各种肾病的重要方法。中分子和大分子的尿蛋白主要由肾小球损伤所致，小分子量尿蛋白为肾小管及其间质病变导致，混合性蛋白尿病变累及肾小球、肾小管和间质。

（1）低分子蛋白尿：分子量范围为1万～7万道尔顿，大多为1．5万～4万道尔顿，主要蛋白带在清蛋白以下，表明有肾小管损害，偶可见溢出性蛋白尿。在尚未波及肾小管的肾小球疾病，虽然溢出较大量的小分子蛋白，但是由于肾小管重吸收正常，故尿内含小分子量蛋白质不增加。

（2）中分子蛋白尿：分子量范围为5万～10万道尔顿，大多数为5万～7万道尔顿，主要蛋白带在清蛋白左右，表示有肾小球疾病。

（3）大分子蛋白尿：分子量范围为5万～100万道尔顿，大多为6万～50万道尔顿，即主要蛋白带在清蛋白以上，表示有较严重的肾小球疾病。

（4）混合性蛋白尿：尿中含有大、中、小各种分子量的蛋白尿，表示肾小球和肾小管都有损害，提示病变较严重，表示整个肾单位受损，如CRF晚期、严重间质性肾炎累及肾小球等。

尿蛋白电泳还可用于蛋白尿伴大量血尿时，排除因低渗尿红细胞溶解破坏造成的假性大量蛋白尿，因溶解的血红蛋白分布于β球蛋白区，还可鉴别多发性骨髓瘤大量轻链蛋白造成的大量蛋白尿。

5．微量清蛋白尿　微量清蛋白尿指尿中清蛋白含量高于健康人参考范围，但常规方法无法检出，采用放射免疫分析法、酶联免疫吸附（ELISA）法或免疫透射比浊法可检出。常规尿蛋白阴性，用上述任意一种方法若检出尿白蛋白排泄率达20～200微克／分或尿白蛋白量30～300毫克／24小时即为微量白蛋白尿。其病理性增高常见于糖尿病肾病、原发性高血压、妊娠子痫前期，是肾损伤的早期敏感指标。

6．尿蛋白／尿肌酐（ACR）　由于24小时尿蛋白定量受尿量收集准确与否、被检对象活动状态等诸多因素影响，因此，近年来以检测随意一次尿液中尿蛋白与尿肌酐比值（ACR）代替24小时尿蛋白定量。比如ACR比值＞3．0或＜0．2分别相当于尿蛋白定量＞3．0克／24小时或＜0．2克／24小时。当然ACR同样受许多因素影响，如晨尿蛋白含量低，蛋白和肌酐检测方法本身误差的叠加等。但目前仍认为尿ACR检测值得采用，尤其对那些收集24小时尿液有困难者。