菌种质量的检验与保藏

第五节　菌种质量的检验与保藏

一、菌种质量的检验

（一）优质菌种的标准

优质菌种的标准可概括为“纯、正、香、壮、润”。

1.纯　纯度高，不能染有任何杂菌或混有不同的品种。

2.正　菌丝色泽正，有光泽，无老化变色及吐黄水现象。

3.香　有清香味，不应有其他异味。

4.壮　菌丝体健壮、分支浓密、生命力强、萌发快。

5.润　培养基湿润，无干缩现象。

（二）菌种质量检验的方法

1.直接检验法　此法即通过“看、闻、提”来检验。

“看”是首先看菌种外观，是否有破管、破瓶、破袋等情况，再看是否“纯、正、壮、润”。

“闻”是指在一批菌种中随机抽取部分样品，拔掉封口物，嗅其气味，若有酸、霉、臭味，则说明已经被感染，不能再用。

“提”是指手提封口物，看松紧是否适宜，过松过紧都不能保证优质。

2.生长检验法　此法是指对待检验菌种经过扩接到新的培养基，观察其生长情况、适应性及抗杂性等特性。

3.出菇检验法　出菇检验法可算是最终检验法，是最信得过的检验法。是创造出菇条件，让其出菇，观察出菇情况，凡用于大规模生产的菌种，都必须经过出菇检验。

二、菌种保藏

在菌种生产中，往往由于多次转接或者人为因素的影响，使菌种产生老化、退化现象，给生产带来巨大损失。为了使菌种的优良性状得以保持或减少变异，就必须对菌种进行必要的保藏。菌种保藏就是要采取各种手段保持其原有的优良性状，这就要求尽可能地减少其繁殖传代的次数以防变异，因此必须减缓菌种生长代谢的速率，使之基本处于休眠状态。菌种保藏的基本原理就是创造一种低温、干燥、低氧的特殊环境，从而使菌体维持最低的生理代谢状态。

菌种保藏的方法很多，下面介绍几种常用的方法。

（一）斜面低温保藏法

斜面低温保藏法是最简便、最常用的方法，将长满斜面的母种试管装入干净的塑料袋内，扎好袋口，放在4℃的冰箱内保存，4～6个月转管一次。该法适合于大多数食用菌种类。

但草菇不耐低温，4℃下即可冻死，要在15℃以上保存。

（二）液体石蜡保藏法

液体石蜡保藏法是在菌种斜面上灌封一层无菌的液体石蜡，从而减少培养基水分散失，降低氧气含量，进而降低菌体的生理代谢活动。首先对液体石蜡进行高温消毒灭菌，然后放入40℃烘箱内烘干石蜡中的水分，在无菌条件下通过无菌操作将石蜡油移接于母种试管内，液面高出菌种斜面上端1厘米为宜，封口，直立于室温下保存，不能放于低温冰箱内保存，否则菌丝会死亡。此法可使菌种保存达10年之久。

恢复培养时，通过无菌操作挑出菌丝，用无菌水冲洗掉石蜡油，接种后待第一次菌丝体萌发长出菌落时，再进行一次转接。

（三）麦粒保藏法

取饱满小麦粒，淘洗后用20℃温水浸泡5～6小时，使麦粒含水量约为25%，捞出，晾干表面水迹，分装于试管内灭菌，通过无菌操作接入待保存菌种的菌丝悬浮液，摇匀培养。当麦粒上出现稀疏的菌丝体时，终止培养，保存于干燥冷凉处。需要注意的是，麦粒含水量宜低，灭菌后的麦粒不能破肚，这样可使长入麦粒内的菌丝体有麦皮的保护，以延长保藏期。

（四）蒸馏水保藏法

将长满斜面的母种试管，经无菌操作，接入经过灭菌的蒸馏水，接入量以高出培养基顶端1～2厘米为宜，管口换用经过灭菌的橡皮塞封口，在室温或低温下保藏。可保藏1年以上。

（五）麸皮保藏法

将麸皮拌湿，但要比其他的培养基含水量低，灭菌后接种培养，待菌丝长好后保藏于20℃以下的室内，可保存2～3年。

以上均为常用母种保藏方法。在生产中，有时也有必要对部分原种及少量的栽培种予以保藏。原种、栽培种的临时保藏主要用低温条件来保藏。