食用菌菌种的保藏技术

实训七　食用菌菌种的保藏技术

学习目标

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知识目标

◎了解食用菌菌种容易变异和退化的特性。

◎掌握利用低温、干燥、缺氧进行菌种保藏的原理。

◎学会保持食用菌菌种的生活力及优良性状的主要方法。

技能目标

◎会进行菌种保藏。

一、材料及用具

平菇母种试管，蘑菇或灵芝八成熟的子实体，木屑培养基（装入菌种瓶，经1.5 kg/cm²高压蒸汽灭菌1小时后备用），液体石蜡（装入三角瓶中，经高压蒸汽灭菌后，40℃干燥箱烘干水分后备用），滤纸条（装入培养皿中经1kg/cm²高压蒸汽灭菌后备用），灭菌插菇铁丝架，无菌空试管（带棉塞与变色硅胶），接种箱，接种用具，无菌镊子，固体石蜡，坩埚，酒精灯，试管架或铁丝筐，塑料薄膜，牛皮纸，捆扎绳，标签，普通冰箱，等等。

二、实训内容

先将接种箱的表面进行消毒灭菌，在无菌条件下操作如下。

（一）斜低温保藏法

利用增加了氮源和磷酸氢二钾的保种培养基移接平菇母种，待菌丝长至斜面2/3时，选择菌丝生长粗壮整齐的母种试管，将试管口的棉塞用剪刀剪平。利用酒精灯在坩埚里溶化固体石蜡，用以密封试管口，在外包扎一层塑料薄膜。最后将试管斜面朝下，置入4℃冰箱里保存。

（二）木屑培养基保藏法

提前两周，将平菇母种移接入已灭菌的木屑培养基的菌种瓶内，待菌丝长满培养基1/2时，剪平瓶口棉塞，用蜡密封，包扎牛皮纸扣置于4℃冰箱内保藏。

（三）矿物油保藏法

选择优良的平菇母种试管放进已消毒的接种箱内，在无菌条件下操作。将种管竖立于试管架或铁丝筐内，将已灭菌的液体石蜡注入种管内，淹没菌苔，液体石蜡的量高出斜面尖端1cm为宜。最后用牛皮纸包扎试管口，立放，闭光保藏。

（四）孢子滤纸保藏法

将蘑菇或灵芝置入已消毒的接种箱里的插菇铁丝架上，插菇铁丝架立于装有灭菌滤纸条的培养皿内，待担孢子弹射在滤纸条上之后，用无菌镊子将载有担孢子的滤纸条移入灭菌的空试管内，塞入棉塞剪平，用石蜡密封，干燥，低温保藏。