母种质量标准与检验方法

六、母种质量标准与检验方法

培育出一个优良菌株需要几年甚至十几年的时间，即使已经获得优良菌株，也不可能一劳永逸。因为一个优良菌株在长期栽培和保藏过程中，由于转接次数增多，培养时间过长，或受不良环境条件影响，常会发生种性衰退、遗传性变异。一个优良菌种应具有“纯、正、壮、润、香”的共性，即：菌种纯度高，没有杂菌感染，不混其他类似菌种;菌丝色泽纯正，多数菌种菌丝纯白色、有光泽，菌丝粗壮，分枝多而密，在新培养基上吃料快，生长势旺;培养体湿润，与试管壁紧贴不干缩，含水量适中;具有这个品种特有的清香味，没有霉、腐气味。

1.黑木耳母种标准

菌丝白色，较细密，整齐，平贴于斜面培养基，不爬壁或爬壁力弱，生长速度较慢，15天长满试管斜面。有些品种可产生次生孢子，使培养基表面的菌丝带有粉末状物;有些品种在斜面培养基上形成小原基。如果菌丝长满斜面后出现黄斑，培养基逐渐变成褐色、浅黑色，说明菌种老化，应淘汰。

2.母种质量检验

分离、引进和人工选育的黑木耳菌种在生产前应进行鉴定，证明生产性状、遗传性状和经济性状优良方可扩大繁殖，投入生产。鉴定检查菌种质量常用以下七种方法：

(1)肉眼直接观察：对引进的黑木耳菌种先用肉眼观察，包装是否合乎要求，棉塞有无松动，试管有无破损，棉塞和试管有无病虫侵染，菌丝色泽是否正常，有无老化现象。如果菌丝浓白、粗壮，富有弹性说明生命力强;如果有少数子实体及茶褐色被膜，只要将它除去，仍可使用。如果菌种已收缩、干燥，或菌丝体自溶，产生大量红褐色液体，说明生活力变弱，不宜使用。在试管口作深吸气，闻其是否具有该菌种特有的香味，如果有该品种应有的气味说明菌种纯正;如果有其他异味，如酸味、霉味，说明是劣质菌种，不宜使用。

(2)液体培养鉴定：配制2%的糖溶液，用500毫升三角瓶装100毫升，塞棉塞，常规高压蒸汽灭菌。在无菌接种箱中挑取豆粒大小的菌块接入糖水三角瓶中，于25℃～28℃培养3～7天，如果液面出现气泡、产生“油皮”或发生浑浊等现象，说明菌种本身带有杂菌;如果菌块下沉，或迟迟才长出薄薄的菌丝层，说明菌种生活力弱;如果菌块四周菌丝生长快，且浓白，呈棉絮状，表明菌种生命力强。

(3)显微镜检查：借助显微镜对黑木耳菌丝进行观察，以达到鉴定菌种目的。事先准备好显微镜、载玻片、盖玻片、吸管、镊子、接种针、蒸馏水等物品。在载玻片上放1滴蒸馏水，然后挑取少许菌丝置水滴上，盖好盖玻片，再放在显微镜下观察。也可通过普通染色后进行镜检。如果菌丝透明，呈分枝状，有横隔，锁状联合明显，再加上具有不同品种固有特征，认定为合格菌种。

(4)菌丝长速测定：将母种接入新配制的试管斜面培养基上，放在适宜的温度条件(24℃～26℃)培养。如果菌丝生长迅速，整齐浓密，健壮有力，表明是优良菌种;如果菌丝生长缓慢或长速特快，稀疏无力，参差不齐，易于衰老，表明是劣质菌种。

(5)耐高温测试：先将试管母种数支置于最适温度条件培养，7天后取出部分试管置30℃培养，24小时后放回最适宜温度条件培养。经过偏高温培养处理后，如果菌丝仍然健壮、旺盛生长，表明该品种具有耐较高温度的优良特性;反之，菌丝生长缓慢，且出现倒伏发黄、萎缩无力，则为不良菌种。

(6)吃料能力鉴定：将母种接入最佳配方的原种培养基中，放在适宜的温、湿度条件培养，7天后观察菌丝生长情况。如果菌种块很快萌发，并迅速向四周和培养料中生长蔓延，说明该品种吃料能力强;反之，菌种块萌发后生长缓慢，不向四周和料层深处生长，表明该品种对培养料适应能力差。

(7)出耳试验：经以上六方面考核认定为优良菌种，可扩大转管，然后取出一部分母种用于出耳试验，鉴定菌种实际生产能力。出耳试验采用袋栽法，根据黑木耳品种对木质素、纤维素的分解能力及对营养的要求，选择合适培养料，主要以木屑培养料为主，然后装袋、灭菌、接种，置适宜温、湿度条件培养，当菌丝长至袋底后，再过7天即可移到最佳出耳条件划口或扎眼出耳。

在试验过程中，经常观测菌丝生长和出耳情况，如接种块萌发时间、菌丝生长速度、吃料能力、出耳速度、子实体形态、产量和质量。最后通过综合分析和评比，选出菌丝生长速度快、子实体生长健壮、品质好、产量高的母种进行生产和销售。