单倍体植株的鉴定

鉴别单倍体的方法很多，主要有形态学观察、细胞学观察、杂交鉴定、流式细胞仪鉴定、分子标记鉴定和荧光定量PCR鉴定法等。

1）形态学特征鉴定法

相对于正常二倍体，单倍体植株瘦弱、叶片窄小、花小柱头长、花粉粒小等，所以易于鉴别。这是一种直观便捷的方法，但往往需要植物生长发育到一定时期才能进行。因此，对于一些生长周期较长的木本植物来说不太适用。

2）细胞学观察鉴定法

染色体计数法，通常取根尖、茎尖等分生组织区进行制片，直接计数染色体数目。此法对于一些染色体较小的植物种类则不适用。

另外，由于植株的染色体倍性水平与叶片保卫细胞大小、单位面积上的气孔数及保卫细胞中叶绿体的大小和数目通常呈正相关性，这样在幼苗期即可以通过叶片气孔保卫细胞叶绿体数目、气孔大小和气孔密度等测定植株的倍性水平。此法快捷、简易、可靠，尤其适合一些染色体较小的种或品种，但是叶绿体计数法无法分辨嵌合体。

3）杂交鉴定法

通过自交或测交鉴定，看后代分离情况确定二倍体植株是来自小孢子还是体细胞。

4）流式细胞仪鉴定法

细胞核中DNA含量反映一个细胞的倍性，因此常常用DNA含量来估计细胞的倍性。流式细胞仪主要通过测定叶片单个细胞中DNA的含量确定细胞的倍性，材料的使用量可少到1 cm2。

5）分子标记鉴定法

随着分子生物学技术的快速发展，以DNA分子为基础的倍性测定方法如RFLP，RAPD，AFLP等分子标记技术正在逐渐代替以往的以同工酶为基础的鉴定方法。此法涉及引物设计等过程，对被测植物的基因组测序情况有一定要求。

6）荧光定量PCR鉴定法

实时荧光定量PCR是一种在RNA水平上鉴定植物倍性水平的方法，以二倍体为参照，分析目标基因的表达在被测植株中相对于参照的改变量。该方法简便、容易操作，高通量，适合单个基因表达变化的研究，且可变因素较少。但是，并非每一个基因位点的表达都受倍性变化的调控。因此，选择合适的基因位点是应用该项技术的关键点。