细菌的培养和鉴定

在对细菌进行免疫学、致病性、药物敏感等特性进行诊断之前必须先经分离培养获得纯菌种。除梅毒螺旋体等少数菌种以外，大多数细菌都可在人工培养基上生长。不同细菌的适宜生长条件不同，这些条件包括气体环境、温度、培养基的成分、pH值等。多数细菌可在普通营养肉汤或营养琼脂上生长，有些细菌，如奈瑟菌属、棒状杆菌等要求较苛刻，要添加血液成分、氨基酸、维生素、微量元素等。培养厌氧菌需在厌氧罐或厌氧箱中进行，淋球菌的初次分离宜用CO2培养箱。大多数细菌最适宜的培养温度为37℃，通常经16～24h可见到细菌生长。获得分离培养的细菌后常辅以镜检，并和原检样镜检的结果相对照，以获得更准确的结果。

对分离培养的待检细菌需进行鉴定。通常采用以下方法进行鉴定：

1．培养特性

（1）液体培养的特性：细菌在液体培养基内生长，可使培养基出现混浊或沉淀，有的形成菌膜，菌膜的厚薄、表面光滑或皱褶等均可协助诊断。

（2）半固体培养的特性：半固体培养基作穿刺培养可观察细菌有无动力。半固体培养基也可用作鉴定厌氧菌的生化试验用培养基。

（3）固体培养的特性：用于分离培养和菌落形态观察的培养基主要是各种组成成分的平板培养基。菌落的形态、性质、颜色、是否形成向培养基扩散的水溶性色素、溶血性及气味等均是鉴别细菌的重要特性。例如葡萄球菌在普通营养琼脂培养基上37℃，培养18～24h，可形成菌落，菌落呈圆形、凸起、光滑、边缘整齐、金黄色，大肠杆菌的菌落则呈粉红色，且有异臭味。

2．生化试验　在普通液体培养基内加底物或指示剂可作为生化实验用培养基。生化试验主要包括糖代谢试验、蛋白质代谢试验、盐类利用试验和呼吸酶类试验等，这些生化试验可以协助对细菌进行鉴定。

3．血清学试验　利用含已知特异性抗体的诊断免疫血清鉴定未知细菌，常用的方法是玻片凝集试验，数分钟内即可获得结果。