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检测病毒核酸

时间:2022-07-01 百科知识 版权反馈
【摘要】:随着分子生物学,特别是核酸杂交技术的发展,通过检测病毒特异性核酸在病毒感染的快速诊断中提供了更为精确和敏感的手段。大量研究表明,对可疑单疱病毒性角膜炎的病例可进行泪液或角膜上皮单疱病毒DNA的PCR检测,此方法快速、敏感、准确,不仅可对单疱病毒性角膜炎进行早期、快速的诊断,还可对复发及疗效进行监测,是一种较为实用的诊断方法。

随着分子生物学,特别是核酸杂交技术的发展,通过检测病毒特异性核酸在病毒感染的快速诊断中提供了更为精确和敏感的手段。其检测原理是根据核酸互补的特异性制备探针,将探针与待测标本中的核酸序列进行杂交,然后对杂交后的探针进行测定以了解病毒基因组的存在与否。探针标记可有多种,测定方法亦有所不同。如用生物素标记的探针可用亲和素测定,用地高辛标记的探针可用抗体酶结合物的免疫学方法测定杂交结果。尽管用杂交技术可测出小量的DNA和RNA,但其敏感性低,限制了其广泛应用。如将标本中的DNA先进行扩增,再进行杂交将大大提高其敏感性。其中聚合酶链反应(PCR)技术是最常用的增强检测信号的核酸扩增技术。通过耐热DNA聚合酶重复循环DNA合成,可在体外进行靶核酸复制。对于RNA病毒,可先用逆转录酶形成RNA基因组DNA拷贝,然后对DNA进行扩增。PCR扩增病毒基因联合核酸杂交技术检测病毒基因组具有高敏感性和特异性,仅需少量标本即可测出。不过PCR也有其不足之处,如有产生交叉污染,造成假阳性的可能,需预先测定探针的效果等。因此需结合临床及其他检测方法,以提高诊断准确性。大量研究表明,对可疑单疱病毒性角膜炎的病例可进行泪液或角膜上皮单疱病毒DNA的PCR检测,此方法快速、敏感、准确,不仅可对单疱病毒性角膜炎进行早期、快速的诊断,还可对复发及疗效进行监测,是一种较为实用的诊断方法。

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