血浆皮质酮测定

一、概 述

血浆皮质酮(blood plasma corticosterone,CS)在动物中含量较高,在人类含量较低,约为皮质醇的1/10,但有重要的生理功能。20世纪60年代建立的荧光法、气-液层析法等方法较复杂、费时,近几年对皮质酮的放免分析进行了改进,在特异性和灵敏度上都有明显提高。测定皮质酮是观察和研究肾上腺皮质功能和激素代谢的一个很有价值的指标,但由于皮质酮与孕酮、17-羟孕酮和皮质醇交叉反应,在血中皮质醇的含量又比皮质酮大10倍,因此,在皮质醇存在的情况下,直接测定血浆皮质酮会引入1/6的误差,所以对肾上腺皮质亢进者或行ACTH兴奋试验时不宜直接测定皮质酮,以层析分析较好。

二、病人准备

据统计,8名早产婴儿的平均浓度在出生后6h和24h明显高于12名足月婴儿的平均浓度,因此,早产儿的检查结果应结合临床。

三、标本采集

1.采集时间 上午8:00或下午4:00或上下午都采血3ml于肝素抗凝管中,4h内送检。

2.标本保存 收到标本后立即离心分离血浆测定或4℃保存待测。

四、试验方法及正常参考范围

酶联免疫吸附法:应用间接法测定标本中人皮质酮水平。用纯化的人皮质酮抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入已知浓度的皮质酮标准品和未知浓度的皮质酮待检样品,温育后,加入生物素标记的抗IgG抗体,再与链霉亲和素-HRP结合,形成免疫复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的皮质酮呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人皮质酮浓度。

正常参考范围　上午8:00为12.1～39.1 nmol/L

　　　　　　　下午4:00为7.2～26.0nmol/L

五、临床意义

1.明显升高者多见于18-羟化酶缺陷引起的先天性肾上腺皮质增生症。

2.醛固酮增多症、库欣综合征和ACTH瘤时皮质酮也升高。