血浆载脂蛋白测定

目前已发现载脂蛋白20余种,只有血浆Apo AⅠ和ApoB测定在临床上广泛应用,其测定方法主要有酶联免疫吸附试验和免疫浊度法,尚无公认的参考方法。中华医学会检验分会建议免疫浊度法作为测定血浆Apo AⅠ和ApoB的常规方法,首选ITA法,其次为INA法。

免疫透射比浊法测定血浆Apo AⅠ和ApoB实验如下。

【原理】 利用载脂蛋白的特异抗体与血浆中相应抗原结合,形成抗原抗体免疫复合物,并形成微细颗粒,均匀分散于溶液介质中,光线通过溶液时,浑浊液内的颗粒能吸收光线,并与浑浊颗粒的量成正比。血浆Apo AⅠ或ApoB与相应抗体结合,在一定条件下,形成不溶性抗原-抗体复合物,使溶液浑浊,浑浊度与Apo AⅠ或ApoB的含量成正比,以此定量。

【参考区间】 成年人血浆Apo AⅠ为1.20~1.60g/L,ApoB为0.80~1.20g/L。

【应用评价】 临床上一般同时进行血浆Apo AⅠ和ApoB测定。为达到准确测定的目的,免疫比浊测定应以多点(5~7点)定标,必须按曲线回归方程计算结果。用单点标准计算结果误差较大,不符合免疫比浊法原理,其测定结果不能准确反映浓度的高低(高的偏低,低的偏高)。切忌单点法简便而忽略测定结果的准确性。

【临床意义】 血浆Apo AⅠ水平与动脉粥样硬化性疾病呈负相关,Apo AⅠ降低是冠心病的危险因素。ApoB水平与冠心病发病率呈正相关,ApoB增高是冠心病的危险因素。

Apo AⅠ是HDL的主要载脂蛋白。一般情况下,血浆Apo AⅠ水平与HDL-C呈显著正相关。但某些病理状态下Apo AⅠ的含量不一定与HDL-C成比例,如家族性高三酰甘油血症者HDL-C常偏低,而Apo AⅠ不一定低,不增加冠心病危险;但家族性混合型高脂血症患者Apo AⅠ与HDL-C都降低,冠心病的危险性很高。此外,Apo AⅠ缺乏症、家族性低α脂蛋白血症等,血浆中Apo AⅠ与HDL-C均极低。故同时测定Apo AⅠ与HDL-C有利于临床判断。

ApoB包括ApoB48和ApoB100两种,临床常规测定ApoB100。ApoB100是LDL的主要结构蛋白,约有90%的ApoB100分布于LDL中,故一般情况下,血浆ApoB水平与LDL-C呈明显正相关。但高三酰甘油血症时VLDL极高,小而密LDL(LDL一般可分为A型和B型亚组分,其中B型是小而密的LDL,是动脉粥样硬化发生的强危险因素)增高,因其ApoB含量较多而胆固醇较少,故临床表现为LDL-C不高,而血浆ApoB增高。所以ApoB与LDL-C同时测定对病理状态的分析很有帮助。

知识拓展反映脂质代谢状况新的检测指标不断出现,目前有游离脂肪酸(free fatty acid, FA)、脂肪酸结合蛋白(fatty acid binding protein,FABP)、载脂蛋白E(Apolipoprotein, poE)、小而密低密度脂蛋白(small dense low density lipoprotein,sd LDL)、氧化低密度脂蛋白(oxidized LDL)及脂蛋白代谢相关基因检测等,随着对脂代谢机制研究的逐渐深入和商品化试剂盒的日趋成熟,这些新的检测指标将为临床脂代谢紊乱和心脑血管疾病提供更灵敏、特异的诊疗信息。