毛细管电泳色谱

毛细管电泳色谱是近年来发展的一种新型高效微分离技术。它是把高效液相色谱的固定相填充在毛细管内或者键合、涂布在毛细管的内表面，以电渗流为流动相的推动力，根据样品中各组分在电场中迁移速度的不同和两相间分配系数的差异来进行分离的。毛细管电泳按毛细管中填充物质的性状可分为自由溶液和非自由溶液，按机制可分为电泳型、色谱型和电泳-色谱型。

电泳法是20世纪30年代提出的根据带电粒子(离子或胶粒)在水相介质中受电场作用致迁移速度的不同而分离分析的技术。至今，电泳技术仍在医学、生物化学和分子生物学领域中大量用于分离分析蛋白质、多核苷酸及其他生物大分子。由于该法效高、分离速度快、样品量小、仪器简单，特别适用于氨基酸、多肽、蛋白质和核酸等生物分子的测定，顺应了人类发展生命科学的需要，因而受到普遍关注和重视。

和一般色谱技术不同的是，毛细管电泳色谱分离原理不是基于组分在流动相和固定相间分配系数不同，而是电场作用下离子迁移速度的不同而达到分离的目的。其所用的仪器包括高压电源、毛细管、电解质贮液槽及检测器等部分。基本结构如图8-3所示。

图8-3　电泳色谱仪基本结构

常用毛细管材料为石英材料，一般为烧融石英，外壁涂层为聚酰亚胺，以增强弹性，内径通常为25～75μm，外径为350～400μm，有效长度80～100cm，操作时要求恒温。毛细管电泳色谱的分离效果和高压电源的电压成正比。毛细管电泳具有分离方便、快速、样品用量小的显著特点，使得毛细管电泳迅速成为一种极为有效的分离技术，广泛应用于分离多种化合物，如氨基酸、糖类、维生素、有机酸、无机离子、药物、多肽和蛋白质、神经递质、低聚核苷酸(RNA和DNA)片段等。近年来，毛细管电泳在手性化合物分离、药物分析、DNA分析、代谢分析和环境分析等领域得到越来越广泛的应用。