氨基酸和蛋白质的性质

实验三十　氨基酸和蛋白质的性质

一、实验目的

1．验证氨基酸和蛋白质的性质。

2．设计鉴别氨基酸和蛋白质的化学方法。

二、仪器与药品

1．仪器:水浴锅。

2．药品:清蛋白、CuSO₄、醋酸铅、HgCl₂、（NH₄）₂SO₄、5%HAc、苦味酸、鞣酸、茚三酮、1%甘氨酸、1%酪氨酸、1%鸡蛋白、浓HNO₃、20%NaOH、饱和CuSO₄、硝酸汞试剂、30%NaOH、苯酚、无水乙醇、0．1mol/L HCl、三氯乙酸。

三、实验内容

1．氨基酸的性质

取2支试管，分别加入0．2mol/L甘氨酸、酪氨酸悬浊液（用时应摇匀）各1ml。然后各加入茚三酮试剂2～3滴，在沸水浴中加热10分钟，观察有何变化，记录。解释发生的现象并写出化学反应式。

2．蛋白质的颜色反应

（1）茚三酮反应:在试管中加入蛋白质溶液，然后加3滴茚三酮溶液，在沸水浴中加热10～15分钟，观察现象?

（2）黄白质反应:取2试管，在1支中加5滴苯酚;在另1试管中加5滴蛋白质溶液，然后分别加入2滴浓硝酸，观察在蛋白质溶液中是否有白色沉淀生成?将两支试管放在沸水浴中加热，此时两支试管各有什么现象。

（3）缩二脲反应:在试管中加入5滴蛋白质溶液和5滴氢氧化钠，摇匀后，加入2滴硫酸铜，振荡，观察颜色变化。

3．蛋白质的沉淀

（1）沉淀蛋白质:在试管中分别加入2ml蛋白质溶液和饱和硫酸铵溶液，混匀后，静置10分钟，球蛋白将析出，将其离心，离心后的上层清液用滴管移至另一离心管中，慢慢加硫酸铵粉末，每加一次，均用玻璃棒充分搅拌，直到粉末不再溶解为止。静置10分钟，则可见清蛋白沉淀析出，离心并吸去上层清液。

向上述两离心管沉淀中分别加入蒸馏水2ml，用玻璃棒搅拌，观察沉淀能否溶解。

（2）沉淀蛋白质:在试管中加入5滴蛋白质溶液，沿试管壁加入10滴无水乙醇，摇匀，静置数分钟，观察溶液能否出现浑浊。

4．蛋白质的变性

（1）在试管中加入5滴蛋白质溶液，然后加入1滴盐酸使其酸化，再滴加2滴三氯乙酸，观察沉淀的生成。取2滴蛋白质溶液于点滴板上，加1滴苦味酸，（必要时加0．1mol/L盐酸酸化）观察沉淀生成。

（2）在4支试管中，各加入5滴蛋白质溶液，然后依次加3滴HgCl₂（30g/L）、AgNO₃（30g/L）、醋酸铅（30g/L）、CuSO₄（30g/L），观察沉淀生成。

（3）在试管中加入2ml蛋白质溶液，置沸水浴中加热5分钟，观察蛋白质的凝固现象。

四、实验讨论

1．怎样区分蛋白质的可逆沉淀和不可逆沉淀?

2．在蛋白质的缩二脲反应中，为什么要控制硫酸铜溶液的加入量?过量的硫酸铜会导致什么结果?