在各群体中，采用卡方检验对16个微卫星位点进行Hardy-Weinberg平衡检验，结果如表17所示。三疣梭子蟹4个家系的各位点不同程度地偏离了Hardy-Weinberg平衡，其中F4有6个位点偏离极显著，2个位点偏离显著；F3有5个位点偏离极显著，3个位点偏离显著；F2有11个位点偏离极显著，有1个位点偏离显著；F1有4个位点偏离极显著，有4个位点偏离显著。从总体上来看，这些位点均符合Hardy-Weinberg平衡，适合用于本研究的分析。
表17 16个微卫星位点在各家系中的Hardy-weinberg平衡检验
通过POPGENE软件对各家系进行F-检验，结果（表18）显示，根据Wright（1978）对遗传分化指数的界定，各家系之间存在轻度遗传分化（Fst , 0.05）的位点为0个；有中度遗传分化（0.05 , Fst , 0.15）的位点为8个；有较大遗传分化（0.15 , Fst , 0.25）的位点为3个；有很大遗传分化（0.25 , Fst）的位点为6个。Fst值均大于0.05，表明4个家系之间遗传分化较强。各家系的平均基因分化系数为0.1.0 7，表明19.07%的遗传分化来自群体间，80.93%的遗传分化来自群体内。另外，对Fis值的计算显示，4个家系在整体上均表现为一定程度的杂合子缺失，其中F4有4个位点、F3有10个位点、F2 有13个位点、F1有8个位点处于杂合子缺失状态。Fis值（近交系数，值大于零表示观测杂合子缺失，值小于零表明杂合子过剩，值等于1时表明杂合体完全缺失）的计算结果表明，就平均数而言，4个家系除F4代表现杂合子缺失外，其他家系均表现为一定程度的杂合子过剩。说明到了F4后，近交作用开始体现，使很多基因出现流失。
人工定向选育是一个复杂的过程，累代选育的人工压力及人控环境势必会造成群体遗传水平的波动，因此要保证选育工作的顺利进行必须保持群体有足够的遗传变异水平（Vandeputte，2003）。意大利在引入日本对虾（Penaeus japonicus）后由于有效群体过小导致近交几率增加，使得第一代至第六代的杂合度下降了61.8%（Sbordoniet al，1986）。在定向选育时为避免类似情况发生，采取一定措施保证足够大的有效亲本数量，能有效防止近交衰退。本实验杂合度的数据变化情况显示，从开始的F1观测杂合度就保持了较高的0.6.3 5，到F4降至0.4.7 4，下降了25.81%，选育家系开始出现近交及瓶颈效应。
（作者：韩智科，刘萍，李健，高保全，陈萍）
表18 16个微卫星位点在三疣梭子蟹4个家系中的F-分析
续表
通过选育手段对家系基因库进行选择可能会造成家系基因水平上的多样性在一定程度上降低。目标性状相关基因纯合化有利于选育性状的稳定和品种特性的形成，但与适应性相关基因位点多样性的降低，可能会导致家系适应性下降。因此，在选育过程中如何使与目标性状相关的基因尽快纯合固定，而其他基因位点尽可能保持多态，从而保证群体有较高的适应性和进一步改良的潜力，是一个非常值得探讨的问题。
Crawford等（1998）指出由微卫星得出的遗传距离更能反映分化时间的长短，可客观反映群体间的遗传变异和分化。本研究用微卫星标记分析4个家系间的遗传距离，结果表明，F4与F3家系间遗传距离最大（0.4.4 9），F4与F2家系间遗传距离其次（0.3.7 8），F3与F1间的遗传距离最小（0.1.7 8），这个结果提示人们在人工选育时，可进行杂交优势作用来培育出新优良品种。现代杂交优势理论认为：杂交优势的大小在一定程度上取决于亲本间遗传差异的大小，遗传距离愈大所产生的杂交优势愈大。所以可选择遗传距离较大而又具有良好性状的三疣梭子蟹进行杂交实验，并评估最优杂交组合，可以进行优良新品种的培育（孙少华等，2000）。
（作者：韩智科，刘萍，李健，高保全，陈萍）
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