【摘要】： 在ADP存在的条件下，丙酮酸激酶使磷酸烯醇丙酮酸转变为丙酮酸，后经乳酸脱氢酶作用转变为乳酸，同时将还原型辅酶Ⅰ转变为辅酶Ⅰ，NADH在340nm波长处有一吸收峰，NAD在此波长没有吸收峰，故可根据此吸光度改变推算PK活性。 丙酮酸激酶严重缺乏，活性显著降低，仅为正常的5%～25%，杂合子则有25%～50%。继发性丙酮酸激酶活性轻度至中度降低还见于MDS、AML、CML等。
【原理】 在ADP存在的条件下，丙酮酸激酶（PK）使磷酸烯醇丙酮酸（PEP）转变为丙酮酸，后经乳酸脱氢酶（LDH）作用转变为乳酸，同时将还原型辅酶Ⅰ（NADH）转变为辅酶Ⅰ（NAD），NADH在340nm波长处有一吸收峰，NAD在此波长没有吸收峰，故可根据此吸光度改变推算PK活性。
【试剂】
1.1mol/L Tris-盐酸缓冲液pH 8.0。
2.1mol/L氯化钾溶液。
3.0.1mol/L氯化镁溶液。
4.2mmol/L NADP液。
5.30mmol/L ADP液。
6.60U/ml乳酸脱氢酶。
7.50mmol/L PEP溶液。
【操作方法】
1.取肝素抗凝血3.5ml加右旋糖酐1ml，静置30min后弃掉血浆。加1ml右旋糖酐，生理盐水补足4.5ml，反复4～6次，将无白细胞的红细胞液再用生理盐水洗涤2次。洗涤后红细胞悬液加入冰浴的蒸馏水，制成1:20的溶血液，测定血红蛋白，冰浴备用。按表7-12操作。
表7-12 PK活性测定操作表
2.37℃恒温条件下测定吸光度，波长340nm，蒸馏水调零，每分钟测定一次，连续测定10min。
3.计算 PK活性（U/g Hb）＝
△A：每分钟吸光度变化；VC：总体积；Hb：溶血液的血红蛋白浓度；6.22：1mmol/LNADH的吸光度；VH：加入溶血液的量。
【参考值】 正常成人15.0±1.99U/g Hb。
【临床意义】 丙酮酸激酶（PK）严重缺乏，活性显著降低，仅为正常的5%～25%，杂合子则有25%～50%。继发性丙酮酸激酶活性轻度至中度降低还见于MDS、AML、CML等。
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