哪些情况抗原试剂检测为阳性

放射免疫分析是利用放射性核素标记抗原或抗体,再与被测的抗体或抗原结合,形成抗原-抗体复合物进行检测。主要包括放射免疫分析(radioimmunoassay,RIA)和免疫放射分析(immunoradiometric assay,IRMA)。

(一)放射免疫分析

放射免疫分析是由Yalow和Berson于1960年创建的标记免疫分析技术。由于标记物放射性核素检测的灵敏性,本法的灵敏度高达ng甚至pg水平,测定的准确性好,ng量的回收率接近100%。本法特别适用于微量蛋白质、激素和多肽的定量测定。

放射免疫分析的基本原理是:标记抗原(Ag*)和非标记抗原(Ag)与特异性抗体(Ab)进行竞争性结合。在该反应体系,作为试剂的标记抗原和抗体的量是一定,抗体的量一般取能结合40%~50%的标记抗原,而受检标本中的非标记抗原是变化的,故标记抗原抗体复合物形成的量随非标记抗原的量而改变。非标记抗原量增加,结合较多的相应抗体,从而抑制标记抗原与抗体的结合,标记抗原-抗体复合物减少,游离的标记抗原增加,即抗原-抗体复合物中的放射性强度与受检标本中抗原的浓度成反比。将抗原-抗体复合物与游离的标记抗原分离,分别测定放射性强度,可算出结合态标记抗原(B)与游离态标记抗原(F)的比值(B/F),或计算其结合率[B/(B+F)],与标本中的抗原量呈函数关系。用一系列不同剂量的标准抗原进行反应,计算相应B/F值,绘制剂量反应曲线。受检标本在同样条件下测定,计算B/F值,在剂量反应曲线上查出抗原的含量。

(二)免疫放射分析

免疫放射分析(IRMA)是从放射免疫分析(RIA)的基础上发展起来的核素标记免疫测定,其特点为用核素标记的抗体直接与受检抗原反应,并用固相免疫吸附剂作为B或F的分离手段。IRMA于1968年由Miles和Heles设计为双位免疫结合,在免疫检验中取得了广泛应用。根据反应原理分为单位点IRMA和双位点IRMA。

1.单位点IRMA 原理为抗原与过量的标记抗体在液相反应后加入免疫吸附剂,即结合在纤维素粉或其他颗粒载体上的抗原。游离的标记抗体与免疫吸附剂结合被离心除去,然后测定上清液的放射性量。

2.双位点IRMA 原理为受检抗原与固相抗体结合后,洗涤,加核素标记的抗体,反应后洗涤除去游离的标记抗体,测量固相上的放射性量。

不论是单位点还是双位点IRMA,最后测得的放射性与受检抗原的量成正比。

放射免疫分析由于敏感度高、特异性强、精密度高,并可测定小分子量和大分子量物质,所以在医学检验中应用极为广泛,常用于测定各种激素(如甲状腺激素、性激素、胰岛素等)、微量蛋白质、肿瘤标志物(如AFP、CEA、CA125、CA19-9等)和药物(如苯巴比妥、氯丙嗪、庆大霉素等)等。各种检测项目均有试剂盒供应,而且仪器设备并不昂贵,在国内广泛应用。但由于核素的放射性对人体有一定的危害性,必须加以防护,核素实验室的建设须经防疫部门的监督,操作人员须经特殊训练。另外,由于核素有半衰期,试剂盒的货存期较短,因而放射免疫分析在应用中有诸多不便。从长远前景看,放射免疫分析有被取代的趋势,但从目前所需的设备和检测的费用上,放射免疫分析还有一定的优越性,还将在一定时期内被医学检验实验室所采用。