1．检验目的
规范总胆红素（TBIL）检测试验，确保检测结果准确性和重复性。
2．检验原理
测定方法：定时终点重氮法
在此反应中，胆红素与重氮试剂在作为加速剂的咖啡因、苯甲酸甲酯和乙酸存在下发生反应，生成偶氮胆红素。
系统将按比例自动把适量体积的样品和试剂分配到一个反应杯中。所用的样品对试剂比例为1比35。系统将监测520 nm的光吸收变化。此光吸收变化与样品中的TBIL浓度成正比，系统依此计算并给出TBIL浓度。
3．设备性能参数
各种生化分析仪性能指标见相应生化分析仪说明书。
4．标本
详见生化组标本的采集与处理程序。
5．设备和试剂
5.1 设备Beckman公司生产UniCel® DxC800、LX-20生化分析仪。
5.2 试剂
5.2.1 来源：Beckman系统配套试剂
5.2.2 储存条件及稳定性：
5.2.2.1 未开瓶于室温储存的TBIL试剂，储存期可至试剂标签上标明的储存期限。
5.2.2.2 配制之后，本试剂可在其有效期内2～8℃保持稳定30 d。不可冷冻。
5.2.3 准备
5.2.3.1 P/N 442745试剂（300次检测）：将最小隔室（C）的内容物定量转移100μL（0.1 ml）到中间隔室（B）。
5.2.3.2 P/N 476861试剂（400次检测）：将最小隔室（C）的内容物定量转移200μL（0.2 ml）到中间隔室（B）。
5.2.3.3 重新盖好试剂盖子、轻轻倒转几次以充分混匀。必须彻底混匀才能成功地进行校准。
6．容器及试剂添加剂
血液标本采集的容器是：肝素锂抗凝或不抗凝的真空采血管。
添加剂是：肝素锂或不含任何添加剂。
7．校准
7.1 校准物
7.1.1 来源
7.1.2 储存及稳定性：
7.1.2.1 未开瓶的校正剂+2℃至+8℃储存，至试剂瓶上印刷的失效日期。
7.1.2.2开瓶后，重新封口的校正剂可在其有效期内+2℃至+8℃保持稳定24 h。
7.1.3 准备：无需配制，校准剂从冰箱中取出后恢复至室温后才能进行校准。
7.2 量值溯源：见UniCel® DxC800、LX-20生化分析仪使用说明书。
7.3 校准周期：不同批号或超过定标时间需定标。
8．操作步骤
8.1 标本接收及编号
8.1.1 标本接收
有条码标本：打开检验信息管理系统→标本接收系统（条码）→接收标本→存入。
无条码标本：整理标本，审核合格后，对检验申请单或标本进行编号（具体操作详见《标本接收工作程序》。
8.1.2 标本编号 编号总原则如下。
肝功全套检测：1-300号；
肾功、生化、葡萄糖检测：301-500号；
急诊检测：501-600号；
夜班或节假日、周末下午检测：601-700号；
尿液标本检测：701-800号；
体检样本：1001-2000号。
8.2 标本登记或录入
8.2.1 有条码标本排样：打开检验信息管理系统→标本排样系统（条码）→选择仪器→输入样本号→扫描条码号→将样本号标记于试管上→存入。
8.2.2 无条码标本排样：打开检验信息管理系统→资料录入→选择仪器→输入样本编号→录入患者相关信息（如患者ID号，已缴费的输入患者ID号的可调取病人信息，无ID号的则手工录入病人姓名、性别、年龄、诊室等）→录入采样时间及收到标本时间→存入。
8.3 上机操作 UniCel® DxC800生化分析仪24 h待机，简要操作如下。
8.3.1工作前检查：检查仪器、水、电、试剂等。
8.3.2 对需要校准的项目进行校准。
8.3.3 检测Beckman原装高、中、低三水平质控。
8.3.4 对已排样无条码样本进行编程 进入Samples屏幕→输入架号﹑杯号及样本号→选择标本类别→选择项目→点击F10保存。
8.3.5 样本装载
8.3.5.1 将分离完成并已编程结束的样本按程序分配顺序插入样本检测架。
8.3.5.2 将分离完成已排样有条码的样本可随机插入样本检测架。
8.3.6 运行：将已完成装载的检测架放入样本检测轨道并按RUN键，仪器开始运行。急诊条码仪器自动识别，或者急诊样本手工编程时选中“stat”，及时进样。
8.4 检验结果的录入
8.4.1 仪器一般自动将检验结果传入检验信息管理系统。
8.4.2 部分意外不能传入检验信息系统者，可在进入主屏后，点击Results，输入样本号/架号，点击Enter，点击Host 即可。
8.4.3 部分在其他仪器检测结果需录入者：进入检验信息管理系统→资料录入→录审结果→选择需录入的项目名称→录入结果→存入。
8.4.4 部分检测项目复查后需修改结果者：进入检验信息管理系统→资料录入→录审结果→选择需修改的项目名称→录入结果→填写修改原因→存入。
注：检验信息管理系统详细操作见《检验信息管理系统操作程序》。
8.5 检验报告的审核 实验室主管核对项目、分析检验结果，根据复检程序，提出复检要求，确认无误后网络审核发送、打印检验报告，授权签字人签字盖章即可发出报告。
注：仪器详细操作程序、校准程序见《Beckman DxC800操作规程》、《Beckman LX-20操作规程》和《Beckman DxC800系统校准方法》、《Beckman LX-20系统校准方法》。
9．质量控制
9.1 质控品：厂家提供的Beckman原装高、中、低三水平质控物，不需复溶，直接使用。
9.2 控制参数：TBIL
9.3 周期：24 h
9.4 质控物准备 从2～8℃冰箱取出质控物，将已混匀的质控物加入反应杯中，恢复室温15 min。
9.5 质控物的检测
9.5.1 每天早上将Beckman原装高、中、低三水平质控物按《各仪器标准操作程序》常规操作方法对仪器进行室内质量监控，质控结果在允许范围内可进行样本分析。
9.5.2 在每次进行新的校正时，以及按适用的系统手册中的规定进行特别保养或故障排除后，都要进行质控监测，质控结果在允许范围内可投入使用。
9.5.3 每使用新批号试剂时，需监测质控情况，并用前一批号试剂测试过的标本随机选择5个标本上机检测，将两次结果对比分析，偏差需小于该参数1/3CLIA’88要求。
9.5.4 将每日质控情况记录于《仪器使用登记表》。
9.6 质控规则、结果分析及失控处理见《室内质量控制程序》。
9.7 室间质控 每年参加重庆市、卫生部临床检验中心及CAP室间质控。
10．干扰因素及变异的潜在来源
10.1 溶血、脂血对结果有一定影响。
10.2 叠氮化物、枸橼酸盐、龙胆酸、草酸盐、乙酰乙酸对结果有一定影响。10.3 标本、反应液中的颗粒微粒、微小团块可影响结果分析。
11．结果计算及不确定度
11.1 计算公式结果=U×C/S
U：测定管光密度，C：标准管浓度（单位：μmol/L），S：标准管光密度
之后仪器自动计算结果。
11.2 计量单位：μmol/L。
11.3 测量不确定度（表11-14）
表11-14 测量不确定度
12．生物参考区间
血清或血浆：1.7～23.0μmol/L。
13．患者检验结果的可报告区间
血清或血浆：1.7～513.0μmol/L。
14．警告/危急值
14.1 产科、创伤科：血总胆红素≥40μmol/L，立即联系临床医师并作好记录。
14.2 新生儿：血总胆红素≥300μmol/L，立即联系临床医师并作好记录。
15．实验室解释
胆红素测定数据用于诊断和治疗肝脏疾病、溶血性疾病、血液和代谢疾病，包括肝炎和胆囊阻塞。
15.1 血清总胆红素增高,见于病毒性肝炎、中毒性肝炎或肝癌、肝内或肝外胆道阻塞、溶血性疾病、新生儿生理性黄疸、Crigler-Najjar综合征、Gilbert病和Dubin-Johnson综合征等。
15.2 血清结合胆红素增高,见于肝内或肝外胆道阻塞、肝细胞损害（特别是疾病后期）、Dubin-Johnson综合征和Rotor综合征。
16．安全防护措施
16.1 标本的运输必须保证运送过程的生物安全，防止溢出。标本溢出后，应该立即对污染的环境和设备进行消毒处理。
16.2 对标明有传染性疾病的血液标本应特别防护，以不污染环境和保护工作安全为前提。
16.3 在进行检测分析过程中的一切操作活动中，必须遵守相关安全规则。执行必要的防范措施，比如佩戴防护性手套、口罩等。
16.4 血液标本在离心过程中，应将所有标本加盖。离心后，开启试管盖时应防止气雾胶污染环境。
16.5 与标本接触的一切器皿、仪器组件/拆卸组合零件都应视为污染物，因此操作人员不小心接触了这种污染源时，应立即用清水冲洗被污染区域并采取必要医疗措施。
16.6 如果操作人员的皮肤或衣物上沾到了标本或废液，应立即用清水冲洗并进行消毒处理。如果眼睛中溅入标本或废液，用大量的清水冲洗并采取必要的医疗措施。
16.7 在测试样本时，仪器盖子需盖好。
16.8 所有检查过的样本及有关的废弃物，都会给您带来潜在的危险或生物污染。所有废弃样本及废弃物的处理方法同标本的处理程序。
17．注意事项
17.1 对于浓度超过分析范围上限的样品，通常用生理盐水稀释2倍后重新分析，并将结果乘以稀释倍数，以稀释后检测结果落在线性范围内为最终稀释倍数，稀释倍数可在样品编程时将其输入检测系统。
17.2 检测结果的复检，详见《生化组相关复检程序》。
18．参考文献
[1] 叶应妩，王毓三，申子瑜．全国临床检验操作规程．3版．南京：东南大学
出版社，2007．[2] 《Beckman DxC800操作说明书》．[3] 《Beckman LX-20操作说明书》．
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