脂质的制备与处理

第一节　脂质的制备与处理

一、卵磷脂的提取及精制

1．粗磷脂的提取

蛋黄中磷脂的含量约10%。常用的抽提溶剂有己烷、石油醚、苯、甲醇、乙醇、乙醚、氯仿等。磷脂不溶于丙酮等低极性溶剂，因此提取时把溶解和沉淀磷脂两种工艺结合使用。

常用的方法是二元溶剂抽提法。一种方法是先用丙酮处理蛋黄，除去脂肪、甾醇、色素、水等而让磷脂沉淀，然后用氯仿－甲醇二元溶剂抽提磷脂，再用丙酮沉淀，最后蒸去溶剂。例如，将蛋黄一个与丙酮40 mL搅拌混合后离心分离，弃去上清液。用氯仿－甲醇(2∶1) 40 mL抽提丙酮不溶物，抽提液用氮保护，在40℃水浴上减压浓缩至近干，将产品加入丙酮100 mL沉淀磷脂，倾出丙酮，再按上述条件减压干燥，即得粗磷脂。

另一法是先用氯仿－甲醇抽提，再用丙酮沉淀。例如，将蛋黄一个与氯仿－甲醇(2∶1)90 mL搅拌混合后，过滤，滤液用1% NaCl水溶液50 mL洗，分离后用无水硫酸钠干燥。过滤，加入抗氧剂和沸石，在水浴上浓缩至近干。向浓缩物加丙酮30 mL，冰水冷却约15 min沉淀磷脂，过滤，水浴蒸干即得蛋黄粗磷脂。

2．卵磷脂的精制

粗磷脂经柱层析分离即可得纯度较高的卵磷脂。例如，使用中性氧化铝层析柱，以氯仿－甲醇(9∶1)为流动相，上述粗磷脂制成浓度为5%的氯仿溶液，接收液每25 mL为一份，用薄层色谱法检查纯度，将含有纯卵磷脂的接收液集中蒸干，即得精制卵磷脂。

二、脂质的稳定化

由于磷脂极不稳定，容易氧化和降解，因此磷脂应贮存在－20℃的低温下或溶解在有机溶剂中，也有人将磷脂置丙酮中于低温贮存。为了将氧化速率降到最小，可贮存于－70℃条件下。常用的有机溶剂是氯仿－甲醇(2∶1)混合物，这个溶剂系统可以溶解绝大多数脂质成分。所用的溶剂应是高纯度的，因为即使是混有极少量的杂质一经干燥浓度就增加了，特别是有些杂质可能具有化学活性，可以引起脂质的变质，如乙醚降解产生的过氧化物和氯仿降解产生的光气等。光气的形成可以通过在氯仿中加入1%的乙醇来阻止，大部分市售氯仿都采用此法。所有的脂质溶液都应避光贮存，为了防止脂质的氧化，还可以充入氮气。

脂质体制备一般都是从膜材的有机溶液开始，这是为了保证所有膜材组成能达到均匀一致，在制备过程中，如果被包裹药物是脂溶性的，则应加在有机溶液中，而水溶性药物则可溶于水性介质中。

大量有机溶液的干燥可采用旋转蒸发器来进行，通常使用的条件是水浴加热(20～40℃)及减压蒸发(0．0533～0．0933 MPa)。烧瓶的快速旋转可以增加蒸发的表面积，为了防止脂质氧化可以通入氮气。