消毒灭菌效果的监测

四、消毒灭菌效果的监测

(一)压力蒸汽灭菌效果监测

常用生物指示法，以嗜热脂肪芽胞杆菌(NCTClOOO3或ATCC7953，SSIK31)为指示剂，菌片含菌量为(5～50)×10⁵/片，此菌在121℃±0．5℃饱和蒸汽中存活时间≥3．9 min，杀灭时间≤19 min。方法　为灭菌前将菌片放于小试管中，再置于灭菌器不同位置，灭菌后以无菌手续将菌片取出，放入溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基中于56℃培养48 h，如培养基不变色，外观澄清则表示无细菌生长;如外观混浊且培养基变为黄色则表示有菌生长，为灭菌不彻底，要查找原因并重新灭菌。

(二)紫外线杀菌效果监测

常用紫外线强度计来测定。生物指示剂为枯草芽胞杆菌黑色变种(ATCC 9372)，含菌量为10⁵～10⁶ CFU/片。根据对照菌片和照射菌片的回收菌数，计算出一定照射时间的杀菌率，要求对试验微生物的杀菌率达到99．9%以上。

(三)化学消毒剂及其效果的监测

常用指示微生物有金黄色葡萄球菌(ATCC6538)、大肠埃希菌(ATCC8099)、铜绿假单胞菌(ATCC9027)、枯草芽胞杆菌黑色变种(ATCC9372)、白念珠菌(ATCClO2310)，乙型肝炎表面抗原纯化抗原(1．0 mg/mL)。

消毒剂效果鉴定试验有中和试验、消毒剂定性消毒试验、消毒剂定量消毒试验、消毒剂杀菌能量试验、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)抗原性破坏试验。

理化指标为，将消毒剂置20±2℃水浴中，测定在使用浓度下杀灭指示微生物达到消毒或灭菌所需的最短时间(min)。

消毒效果评价标准:对细菌和真菌的杀灭率≥99．9%;对HBsAg，将检测方法　灵敏度10⁴倍或5×10⁴倍(载体试验)的HBsAg抗原性破坏，可判为消毒合格;对枯草杆菌黑色变种芽胞全部杀灭，可判为灭菌合格。在实际应用　中，消毒效果评价取决于有机物保护试验的最低浓度和最短时间为该消毒剂达到实用消毒所需的浓度和时间。