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猫爪草乙酸乙酯部位的柱层析分离

时间:2022-04-26 理论教育 版权反馈
【摘要】:猫爪草乙酸乙酯部位,经硅胶柱层析,石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱,洗脱液减压回收溶剂,得280份。将量多的组分再进行柱层析。其中10~30份合并,经中压柱层析,石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱,薄层层析检视,合并相同组分,得较纯的部位TY1。通过梯度洗脱、反复柱层析分离、薄层检视,将猫爪草乙酸乙酯部位的总成分分割成为五大类较纯组分含量的部位分别命名为TY1,TY2,TY3,TY4,TY5,用于进一步测试其抗肿瘤药理活性。

(一)主要仪器和材料

中压液相色谱仪、转薄膜蒸发器、电子分析天平、层析预柱、柱层析用硅胶G,硅胶H及薄层层析用硅胶G,碘缸、磷钼酸试液、硫酸乙醇试液、石油醚、氯仿、乙酸乙酯等。

(二)方法与结果

猫爪草乙酸乙酯部位,经硅胶柱层析,石油醚-乙酸乙酯(100∶0~20∶80)梯度洗脱,洗脱液减压回收溶剂,得280份。以含0.3%CMC-Na的硅胶G板,以石油醚-乙酸乙酯(8∶2~6∶4)、氯仿-苯-丙酮(20∶1∶4)等为展开剂,以5%磷钼酸试液、硫酸乙醇试液为显色剂,进行薄层层析检视,合并相同组分,得200份。将量多的组分再进行柱层析。其中10~30份合并,经中压柱层析,石油醚-乙酸乙酯(95∶5~50∶50)梯度洗脱,薄层层析检视,合并相同组分,得较纯的部位TY1(110mg)。33~85份合并,经反复中压柱层析,石油醚-丙酮(含1%水)[98∶2]洗脱,合并相同组分,得较纯的部位TY2(1 000mg)。100~120份合并,经反复中压柱层析,氯仿-甲醇(95∶5~50∶50)洗脱,合并相同组分,得较纯的部位TY3(280mg)。125~160份合并,经反复中压柱层析,氯仿-甲醇(含1%水)[97∶3]洗脱,合并相同组分,得较纯的部位TY4(300mg)。161~200份合并,经反复中压柱层析,氯仿-甲醇(含5%水)[93∶7]洗脱,得较纯的部位TY5(350 mg)。

通过梯度洗脱、反复柱层析分离、薄层检视,将猫爪草乙酸乙酯部位的总成分分割成为五大类较纯组分含量的部位分别命名为TY1,TY2,TY3,TY4,TY5,用于进一步测试其抗肿瘤药理活性。

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