首页 理论教育 毛细管等电聚焦电泳

毛细管等电聚焦电泳

时间:2022-04-24 理论教育 版权反馈
【摘要】:毛细管等电聚焦电泳是在分离毛细管内充满两性电解质溶液,随着溶液的迁移使得毛细管内部形成从阳极端到阴极端pH逐渐升高的pH梯度,蛋白质及多肽类的大分子物质因为自身等电点的差异而在梯度上相应的pH处停下来,产生聚焦带从而分离,常用于蛋白质等电点的测定和蛋白质的富集,鉴定异构酶以及研究多克隆抗体、单克隆抗体、血红蛋白亚基等。

毛细管等电聚焦电泳(capillary isoelectric focusing,CIEF)是在分离毛细管内充满两性电解质溶液,随着溶液的迁移使得毛细管内部形成从阳极端到阴极端pH逐渐升高的pH梯度蛋白质及多肽类的大分子物质因为自身等电点的差异而在梯度上相应的pH处停下来,产生聚焦带从而分离,常用于蛋白质等电点的测定和蛋白质的富集,鉴定异构酶以及研究多克隆抗体、单克隆抗体、血红蛋白亚基等。Shen等以CIEF分离肽时,组分的浓缩和分离根据肽的等电点不同可同时进行。在最优条件下,肽的浓缩倍数可超过500倍。CIEF可与MS联用分析蛋白质,可以得到蛋白质的二维分析结果;CIEF/MS还可以在线二维分析大肠杆菌蛋白。常规CIEF分离蛋白质费时且定量不够准确,1994年,随着成像毛细管等电聚焦电泳技术的发明,使得分离时间大大缩短,分离度显著提高,分析结果重复性明显改善。王丽等人利用成像毛细管等电聚焦技术分析3种等电点分别为酸性、中性和碱性的糖蛋白生物技术药物聚乙二醇化重组人促红素(PEGlysated erythropoietin,PEG-EPO)、重组人组织性纤溶酶激活剂TNK突变体(Recombinant human TNK mutant of tussue type plasminogen activator,rh TNK-tPA)及全人源化单抗A,成功地分析了糖蛋白异构体和等电点。

免责声明:以上内容源自网络,版权归原作者所有,如有侵犯您的原创版权请告知,我们将尽快删除相关内容。

我要反馈