分析方法建立的前期准备

3.1.1.1　重视并做好文献总结、整理工作

在建立分析方法之前，首先应进行充分的文献调研，充分了解待测药物的特性及体内存在状况。文献调研主要包括三方面的内容:①药物的理化性质;②了解药物在体内的吸收、分布、代谢及排泄的大致过程，这主要通过药物的药动学参数来描述，包括半衰期、清除率、表观分布容积，口服药物还有达峰浓度及达峰时间;③文献已报道的药物分析方法及生物样品的预处理方法。通过查阅文献，总结并比较各种不同的分析条件，一般来说，会首先选择最简单的分析条件及样品处理方法进行摸索并作进一步的调整。

对于文献尚未报道的药物，在选择样品处理方法及检测方法时，可以查阅同类药物的相关文献，同时根据药物的理化性质选择合适的方法。药物的pKa值、亲脂性、溶解度、分配系数都能够为样品预处理和检测方法提供线索。具有亲脂性的药物可根据其pKa值选择在适当的pH条件下用溶剂萃取;具有强极性或亲水性的药物，可以用沉淀蛋白、固相萃取、离子对萃取或衍生化后萃取等方法处理;具有挥发性的药物一般可以选择气相色谱法进行测定，而药物的光谱或电化学特性则决定了检测器的选择。对酸碱不稳定的药物，应当避免使用强酸或强碱性溶剂;对热不稳定的药物则应当避免高温蒸发溶剂。

3.1.1.2明确测定的目的与要求

测定的目的与要求直接影响着分析方法的建立。例如，药代动力学主要研究药物在体内的吸收、分布、代谢和排泄过程，阐明药物在人或动物体内浓度的经时变化过程、药物代谢途径和代谢产物的结构。因此，在药代动力学研究过程中，通常要求同时测定原型药物和代谢产物，并要求方法具有较宽的线性范围(需测到Cmax的1/10～1/20)、较高的灵敏度和准确度，常用方法如HPLC、LC－MS或LC－MS/MS等。然而，在临床治疗药物监测中，药物浓度通常在有效浓度范围之内，线性范围不如药代动力学研究时所要求的那么宽，但要求及时得到浓度数据并反馈到临床，在分析方法上更注重简便、易行;同时，由于临床患者普遍有合并用药的现象，所建立的分析方法应具有更好的特异性和选择性，如常用UV、RIA或EIA等。在中毒患者的临床抢救中，通常药物浓度极高，因此不必强调方法的灵敏度，而应强调方法的特异性和分析速度。

3.1.1.3　实验室条件

在建立体内药物分析方法时，还应充分考虑到实验室现有的实验条件，选择可行的分析方法。另外，应当检查分析方法建立所需要的试剂、耗材是否齐全，为分析方法的开发做好充足的准备。