计量仪器的维护和管理

计量仪器是临床实验室的基本实验工具,计量仪器的准确性直接关系到临床实验结果的准确性。因此,必须掌握此类仪器的使用规则和校正方法,并定期送(请)计量部门进行检修。

(一)电子天平

1.电子天平的环境要求 电子天平应安置在平整靠墙、稳定的工作台上,避免振动、阳光直射,远离放射源、致热源、空调和气流。天平应与电、磁设备保持足够的距离。放置电子天平的环境温度保持在-5℃~30℃,湿度保持在45%~60%。

2.电子天平使用时的注意事项

(1)使用前必须检查水准仪,使气泡处在圆环中央,如出现偏移,需调节水平调节脚。首次使用天平时,必须先通电预热30分钟以上。平时也要使天平一直处于通电状态,不用时,按OFF键关机,不要拔掉电源,这样做可以使天平始终处于稳定状态。

(2)称量前,应先估量待测物质的重量,以免超载。称量时,要及时关闭防风罩,等数值稳定后再进行读数。

(3)防风罩内不需放置干燥剂,只要电子天平保持长期通电,仪器就会自动将机壳内的水分挥发,因此,不必担心潮气对仪器的损害。

(4)称量易挥发和具有腐蚀性的样品时,应放在密闭的容器中,避免腐蚀、损坏天平。同时避免使用滤纸或玻璃纸作称量容器,以免静电干扰及空气浮力增加影响称量的准确性。

(5)不能称量具有磁性或带静电的物体。

(6)出现示值飘移时,应使用无磁砝码进行检查,首先排除天平故障,再进一步检查称量物是否吸湿或蒸发,是否带静电或磁性。

3.电子天平的维护和保养 电子天平应经常保持内部清洁,使用完毕要及时清扫天平内外(切勿扫入中央传感器孔),在清理秤盘及天平室内的污渍时,可用绸布或蘸取无水乙醇及少许肥皂水,切勿采用强酸、强碱性去污剂进行清洗;防风罩应定期用无水乙醇进行擦洗,以保证天平的玻璃门能够正常开关。

4.电子天平的校准 电子天平在首次使用、变换工作场所、称量环境剧烈变化(温度、气压、地心引力等)及每天称量样品前,必须参照国家计量检定规程对天平进行校准。同时,每年需委托专业计量单位对电子天平进行计量鉴定,鉴定合格后发放鉴定合格证书,并标明鉴定时间和有效期。

(二)分析天平

分析天平的使用和维护

(1)0.01g以上物质的称量使用普通天平,0.01g以下物质的称量应使用分析天平,但称量物品的重量不能超过天平的最大称重量。

(2)使用天平称量前必须检查水准仪气泡是否处于圆环中央位置,天平横梁、称盘挂钩的位置要保持正常,标示值应归零位。

(3)称量的样品应放在左边的称盘,砝码放在右边的称盘。

(4)其他同以上电子天平。

(三)加样器皿

玻璃量具和定量加样器是临床实验室定量移取液体和试剂的主要工具。量具的准确性直接决定定量实验的准确性。虽然目前许多定量实验的操作多被自动化仪器所代替,但加样器的使用仍然十分广泛。

1.吸量管 吸量管是一种用来准确移取特定体积液体到另一个容器的仪器,常用于量取体积小的溶液。为了保证移取结果的准确性,每批新购进的吸量管应进行抽样校正,校准方法主要有水称重法、水银称重法、比色法、滴定法等,其中水银称重法的准确性最高。

2.加样器 加样器又称移液器或加样枪,分为可调式和固定式,用于量取微量的液体。量取10μl以下液体的加样器称为微量加样器。微量加样器的正确使用和校准直接影响实验结果,使用时应注意以下事项。

(1)调整加样器量程时要由大到小,由小调到大时应先多调1/3圈后再反调至目标值。加样器不使用时应将量程调到最大,使弹簧处于松弛状态,然后悬挂于加样器的支架上,有利于保养。

(2)吸取液体时应缓慢、平稳地松开拇指,绝不能突然松开,以防止因液体吸入过快而冲入取液器内,形成腐蚀柱塞而造成漏气。

(3)为了获得较高的精度,量取时吸头应预先吸取一次样品溶液,然后再进行正式移液,因为如在吸取血清蛋白质溶液或有机溶剂时,吸头的内壁会形成一层“液膜”,由此可造成排液量偏小而产生误差。

(4)吸取浓度和黏度较大的液体时,也会由于“液膜”的存在而产生误差,为消除此误差,可由试验确定误差的具体补偿量,用调节旋钮改变读数窗的读数来进行设定。

(5)加样器中如有溶液存在时,不得倒放,必须垂直放置。

(6)加样器是精密量器,随着使用时间的延长,其准确性也会有所下降,因此应视其使用频率定期进行校正。校准方法多采用水称重法,根据1毫升蒸馏水20℃时重0.9982克,用电子天平称量所取纯水的重量并进行计算的方法来校正取液器。

(四)分光光度计

分光光度计是精密仪器,在更换光源灯泡、重新安装、移动位置、振动或进行修理后都可造成单色波长的位移,应进行波长、杂散光、线性三项性能检查。即使是正常工作的分光光度计,每隔1个月也要检查一次波长,必要时需进行校正,才能保证测定结果的准确性。另外,在仪器工作不正常时,还需要对其稳定性、重复性、灵敏度及比色皿配套等进行检查。

1.波长检查 方法有镨钕滤光片法、有色溶液校正法、干涉滤光片法、汞灯校正法。镨钕滤光片因其具有固定的光谱吸收特性,性能稳定、峰位准确,适用于光度计波长的细测和测定杂光的存在。镨钕滤光片法波长校正的操作步骤是:①接通电源,打开开关,使仪器预热20~ 30分钟。②旋动波长调节旋钮,使波长盘指示在585nm处,在比色杯位置插入一白色纸条,旋动光度调节旋钮至最大,在比色室白纸上如看到黄色光斑,说明波长在575~600nm。③取出白纸条,把波长是585nm的镨钕滤光片插入光路,调节“100%”旋钮使指针位于透光率(T) 50%的位置,左右轻轻旋动波长调节旋钮,使透光度最低。如透光度最低时的波长读数为585 ±1nm,则表明仪器波长是正确的。

2.杂散光检查 在吸光度测定中凡是检测器感受到的不需要的辐射都称为杂散光。杂散光的来源有:①仪器本身的原因,如单色器的设计误差、光源的光谱分布、仪器内部的反射及散射、光学元件的老化等。②室内光线过强或仪器暗室盖不严而使光线漏入仪器。③样品本身的原因,如样品有荧光、样品的散射能力强等。杂散光是分析样品时的吸收光,它的存在会对比尔定律产生偏移,随着样品浓度的增加,造成的偏移也随之增大,给结果分析带来一定的误差。杂散光的检测方法是:用黑色纸包裹比色杯后插入比色架内,以阻断光路,调节透光度为0%,再用空气做空白调整透光度为100%,旋动波长调节旋钮至585nm处,插入镨钕滤光片,测出的透光度即为杂散光。

3.线性检查 检测仪器是否能如实反映有色物质浓度的变化。根据比尔定律,有色溶液的吸光度与溶液的浓度成正比例,吸光度对浓度呈线性为合格。

4.稳定性检查 仪器光源的发光强度及检测器的稳定性受电源电压的影响,通过调节电压可以检查仪器的稳定性。

5.重复性检查 待测溶液的浓度相同时,透光也应相同,通过对同一浓度溶液的透光度分别多次进行测定,观察透光度的变化值。

6.灵敏度检查 测定不同浓度溶液的吸光度,观察吸光度的变化值来进行灵敏度检查。

7.比色皿配套 比色皿一般由玻璃、石英或荧石制成,配套使用的比色皿在材质、光径、色泽、厚度、空白吸收上应一致。