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瑞氏染色法

时间:2022-04-14 理论教育 版权反馈
【摘要】:瑞氏染色法常用来染制血涂片,亦可用于穿刺细胞涂片染色。染液配制及染色手续简便,所染细胞核结构显示清楚,但胞质着色欠佳,细胞色彩不够分明。放置愈久,染色愈佳。

瑞氏染色法(wright stain)常用来染制血涂片,亦可用于穿刺细胞涂片染色。染液配制及染色手续简便,所染细胞核结构显示清楚,但胞质着色欠佳,细胞色彩不够分明。

(一)染色方法

1.将涂片一端用蜡笔划2条直线,涂面朝上,平放于染色架上。

2.用滴管吸染液滴于涂片上至染液浸满标本为度。

3.1~2min后滴加等量缓冲液蒸馏水,可轻轻吹动涂片上溶液,使之与染液混合均匀,液体表面露黄色金属光泽时,示染色已呈作用。

4.10~15min后,用自来水缓缓冲洗,染液则自涂片边缘流失,水力不能过大,避免涂片上的细胞丢失。

5.将湿片置于低倍显微镜下观察,一般细胞结构清晰,着色良好。待其自干后,如若着色太淡可复染;如着色太深或有大量沉淀,可用甲醇退色后复染或用醋酸水(1滴冰醋酸加入200ml蒸馏水)迅速分色至红蓝色,以色泽满意为度。

(二)染色结果

细胞核呈紫蓝色,胞质呈灰蓝色。

(三)染液配制

1.瑞氏染液 瑞氏染料0.1g、甲醇60ml,配制时宜将瑞氏染料放置研钵内,加少量甲醇仔细研磨至细滑发亮时,再加适量甲醇研匀后用干净吸管从上层吸取溶液放置棕色细小瓶内,研钵内留下的较浓溶液再反复研磨,并再加甲醇。每次吸取上层溶液所留下底层较浓余液逐次加入甲醇,边研磨边吸取,直至研钵染料完全溶解,此时甲醇全部加入,而研钵亦清洗了。此液宜用棕色瓶密封,放置暗处,持久耐用。放置愈久,染色愈佳。

2.pH6.4缓冲液 磷酸二氢钾66.3g;硫酸氢二钠(无水)2.56g;蒸馏水1000ml。

缓冲液配制后,需用pH计或石蕊纸测定pH,并调其pH至6.4左右。

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