【摘要】：1．HLA血清学分型原理 HLA细胞毒抗体属于免疫球蛋白IgG和IgM类型的抗体。根据死细胞占全部检测细胞的百分比进行打分，进而确定被检抗原是否存在与该抗体相对应的抗原，这种补体依赖的微量淋巴细胞毒试验被称为HLA血清学分型标准技术。血清学检测HLA－Ⅰ类抗原准确率较高，HLA－Ⅱ类抗原的结果不准确，重复性差，难以与分子生物学方法相比。目前，在各中心已很少采用血清学分型方法。
1．HLA血清学分型原理 HLA细胞毒抗体属于免疫球蛋白IgG和IgM类型的抗体。此抗体在补体存在的情况下，能够结合到带有相应抗原的活化淋巴细胞膜表面上，并在膜上打洞，如淋巴细胞不带有相应抗原则无此作用。细胞膜被破坏了的死淋巴细胞，可以用多种方法观察此结果，其中最简单的方法是采用染色法（常用伊红或锥蓝）。染料进入死细胞后使死细胞体积增大并着色，活细胞不被着色。根据死细胞占全部检测细胞的百分比进行打分，进而确定被检抗原是否存在与该抗体相对应的抗原，这种补体依赖的微量淋巴细胞毒试验（Terasaki and McClelland，1964）被称为HLA血清学分型标准技术。
2．HLA血清学分型标准技术 采用Terasaki（60／72）微孔板，孔中包被1种单克隆或多克隆抗体的已知HLA抗体来识别淋巴细胞所带有的未知HLA抗原。淋巴细胞可使用Ficoll或单克隆抗T、抗B抗体磁珠由外周血、脾或淋巴结分离获得。特异性抗体与细胞表面的靶抗原结合后经过活化补体经典途径破坏靶细胞膜，加入曙红或荧光生物染料使死亡的淋巴细胞染成红色，相差显微镜下清楚地观察着色细胞比例（活细胞在曙红染色下未着色，荧光染色下呈绿色），以着色细胞孔进行棋盘分析确定HLA－A，HLA－B，HLA－DRB抗原特异性。
血清学检测HLA－Ⅰ类抗原准确率较高，HLA－Ⅱ类抗原的结果不准确，重复性差，难以与分子生物学方法相比。目前，在各中心已很少采用血清学分型方法。
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