制造癌症动物模型的实验研究

人为什么会得癌？机体处于什么状态下才会得癌？为什么在同样环境、同样条件下有人得癌，有人不得癌？是机体内因、外因，还是内外因？为此，我们应该制造荷瘤动物模型探讨。

（一）进行肿瘤的实验研究，制造荷癌动物模型

当时笔者是湖北省中医学院附属医院临床外科主任兼实验外科研究室主任，便于临床病房和动物实验室课题工作统筹安排、同步协调进行，一边临床手术台上取下无菌肿瘤活体标本，热缺血0．5h即移植于实验动物身上，做了100多次（400只动物）均未成功。其后将小鼠有的切除胸腺再移植，则获得成功（210只动物），有的注射可的松，减低小鼠的免疫力，也可移植成功。切胸腺后5d移植，5～6d后即可长出黄豆大结节，10～21d长至拇指大肿瘤。移植癌可成活3～4周，但不能传代。

1．通过这项研究发现，切除胸腺，可制造荷癌动物模型，注射可的松，也有助于制造荷癌动物模型。

2．研究结论证明，癌的发生、发展与宿主的机体免疫力有关，与免疫器官和免疫器官组织功能有极明显关系。

3．这项研究的结果证实，免疫器官胸腺（Thymus，Th）和免疫功能与癌症的发生、发展有极其确定关系，切除了宿主Th，则可能制造成荷癌动物模型，不切除则不能造成荷癌动物模型，注射抑制免疫药降低宿主免疫，则有助于制造荷癌动物模型，不注射降低免疫药，则不能制造荷癌动物模型。

这项结果说明免疫器官和免疫力与癌细胞移植、着床并长成实体癌呈负相关。免疫缺陷或免疫降低，则移植可以着床长出肿瘤，不会因宿主的免疫细胞识别而吞噬。

（二）究竟是先免疫低下后得癌，还是先得癌后免疫低下

以昆明小鼠320只，分为A组、B组、C组、D组，每组n＝80只，胸腺切除及移植法同前，A组为先切除胸腺，5d后接种癌细胞106；B组先注射可的松，7d后接种癌细胞；C组先接种癌细胞，10d后切除胸腺；D组先接种瘤细胞，10d后注射可的松。结果，A组、B组均接种成功并长出了小瘤，C组、D组则只有18只14d后长出绿豆大小瘤，这项实验结果提示，是先有宿主的免疫功能降低，或免疫器官胸腺有缺陷才能长出肿瘤，若宿主免疫功能良好无损则不易长出肿瘤，由此可以得出这样的结论：先有免疫功能低下而后才有癌的发生发展。若先无免疫功能下降则不易接种成功。本研究提示，提高及保持良好的免疫功能，保护良好功能的免疫器官，才是防止癌症发生的重要措施。

（三）癌转移模型的造模实验

关于癌细胞移植研究，1985年笔者在实验外科实验室进行了数十批人癌细胞移植于去胸腺的小鼠，建立了实体癌移植模型。其后又做了癌转移模型，模拟淋巴转移，我们在60只小鼠爪垫内侧皮下移植106／ml，0．2ml的H22细胞悬液，7～8d后即见足爪垫内侧长出蚕豆大小肿瘤，整个足踝均肿胀被包囊，16d后，有8只小鼠发现右腹股沟淋巴结肿大，建立了淋巴道转移模型。

此后，笔者又模拟血行转移，将H22细胞悬液106／ml，0．4ml注入静脉行静脉内接种，获得了较多肺转移，引起了肺内肿瘤生长。其后又进行了建立实验性肝转移动物模型，80只昆明小鼠分别为A、B两组，每组40只，A组先注射可的松7d，均经1%戊巴比妥钠75mg／kg腹腔内注射麻醉，然后左中腹部做一长0．5cm左右切口，暴露脾，取活体H22肝癌腹水10μl行脾包膜下注射，局部压迫3～5min，以防止癌细胞外溢至腹腔脾包膜下注入的癌细胞不断缓慢地进入淋巴液和血液中。动物被饲养11d后，断颈猝死，取肝进行转移灶集落计数。

结果，A、B组小鼠肝内均有肝癌转移，肝内转移灶数目多少不一，A组数明显多于B组，多为3～5个或以上，直径大小1mm左右。B组多数为1～3个。

实验结果提示，转移与免疫明确有关，免疫功能低下，或应用抑制免疫的药，可以促使肿瘤转移。