螺旋体及其检验

（一）伯氏疏螺旋体

1．螺旋稀疏，运动活泼，革兰阴性，着色困难，Giemsa染色紫红色，Wright染色棕红色。营养要求高，微需氧，5%～10%CO2促进生长，适宜温度35℃，生长慢，液体培养基需2～3周才观察到菌落。

2．是引起自然疫源性传染病——莱姆病的病原体，野生或驯养哺乳动物是主要的储存宿主，主要传播媒介是硬蜱，叮咬部位多出现移形性红斑，发展至晚期主要表现为慢性关节炎、慢性神经系统或皮肤异常。

3．标本采集：皮损组织、淋巴结抽出液、血液、关节滑膜液、脑脊液和尿液等。①直接镜检：暗视野镜检标本中螺旋体的形态和运动；②标本接种改良的Kelly（BSK）培养基进行分离培养；③抗体检测：间接免疫荧光法、ELISA、免疫印迹技术等；④PCR检测标本中的核酸；⑤动物实验。

（二）钩端螺旋体

1．形态与染色 螺旋数目较多，暗视野镜下似细小珍珠排列成的细链，一端或两端弯曲成钩状，运动活泼，常使菌体呈C、S、8等形状，常用镀银染色法染色。

2．培养特性 营养要求较高，在含有血清、蛋白、脂肪酸的培养基（如柯氏培养基）中生长良好，最适温度28～30℃，最适pH7．2～7．4（低于6．5、高于8．4生长不良）。需氧，于液体培养基表面1cm内的部位生长最佳，28℃1周左右，呈半透明云雾状浑浊。人工培养基中生长缓慢，28℃2周后能见透明、不规则、扁平菌落。

3．抵抗力 耐冷，不耐热和干燥，56℃，10min或60℃，1min即死亡，对化学消毒剂极敏感，75%乙醇、0．1%盐酸、硫酸10～ 15min内、0．5%来苏儿10～30min内迅速死亡。对青霉素、金霉素及庆大霉素极敏感，但对磺胺类药物耐药。

4．致病性 一种典型的人、畜共患性疾病及自然疫源性疾病，最常见的储存宿主是鼠类和猪，人类主要感染途径是接触了疫水。

5．检验 发病1周内血液的阳性率高，1周后尿和脑脊液等的阳性率高。①直接镜检：暗视野镜检标本中螺旋体的形态和运动，也可用Fontana镀银染色法及荧光抗体染色法；②标本接种Korthof培养基分离培养；③可采用间接免疫荧光法、ELISA等检测抗体，有脑膜刺激征的抽取脑脊液检测抗体；④PCR检测标本中的核酸；⑤动物实验。

（三）密螺旋体

有多个规则螺旋，两端尖，分致病性和非致病性两大类，对人致病的密螺旋体有苍白密螺旋体和品他螺旋体两个种。前者分3个种：苍白亚种引起人类梅毒，地方亚种引起地方性梅毒，极细亚种引起雅司病。

（四）梅毒螺旋体

为密螺旋体，两端尖直，暗视野镜检运动活泼，常用Fontana镀银染色呈棕褐色，新鲜标本不染色可直接在暗视野下观察其形态和运动方式。不能在人工培养基上生长繁殖。抗原成分①特异性抗原：表面特异性抗原具属特异性，无种特异性；②类属抗原：可刺激机体产生沉淀素抗体或补体结合抗体。抵抗力极弱，对温度、干燥特别敏感，离体在外环境中1～2h即死亡，对常用化学消毒剂亦敏感，1%～2%石炭酸数分钟死亡，对青霉素、四环素、红霉素、庆大霉素均敏感。梅毒是由梅毒螺旋体引起的慢性传染病，可分为后天性梅毒和先天性梅毒，前者主要通过性接触感染，后者从母体通过胎盘传给胎儿，偶然可经输血感染。

检验：①直接镜检。一期取硬下疳渗出液，二期取梅毒疹渗出液，制成涂片用暗视野镜检，如有运动活泼的密螺旋体有助诊断。也可经镀银染色、Giemsa染色后光学显微镜检查。②血清学试验。包括非螺旋体抗原试验和螺旋体抗原试验。