【摘要】：3.5.1 高效液相色谱分离原理高效液相色谱法是以液体作为流动相，并采用颗粒极细的高效固定相的柱色谱分离技术。高效液相色谱法对样品适用性广，不受分析对象挥发性和热稳定性的限制，因而弥补了气相色谱法的不足。在目前已知的有机化合物中，可用气相色谱法分析的约占20%，而80%则需用液相色谱法来分析。高效液相色谱仪由高压输液系统、进样系统、分离系统以及检测和记录系统4大部分组成。
3.5.1 高效液相色谱分离原理
高效液相色谱法是以液体作为流动相，并采用颗粒极细的高效固定相的柱色谱分离技术。高效液相色谱法对样品适用性广，不受分析对象挥发性和热稳定性的限制，因而弥补了气相色谱法的不足。在目前已知的有机化合物中，可用气相色谱法分析的约占20%，而80%则需用液相色谱法来分析。
高效液相色谱分离利用的是试样中各组分在色谱柱中的淋洗液和固定相间的分配系数不同，当试样随着流动相进入色谱柱中后，组分就在其中的两相间进行反复多次的分配(吸附－脱附)。由于固定相对各种组分的吸附能力不同(即保留作用不同)，因此各组分在色谱柱中的运行速度就不同，经过一定的柱长后，便彼此分离，顺序离开色谱柱进入检测器，产生的信号经放大后，在记录器上描绘出各组分的色谱峰。
高效液相色谱仪由高压输液系统、进样系统、分离系统以及检测和记录系统4大部分组成。此外，还可根据一些特殊的要求，配备一些附属装置，如梯度洗脱、自动进样、馏分收集及数据处理等装置。其流程(图3-6)是:贮液器中的载液(需预先脱气)经高压泵输送到色谱柱入口，试样由进样器注入输液系统，流经色谱柱进行分离，分离后的各组分由检测器检测，输出的信号由记录仪记录下来，即得液相色谱图。
图3-6 高效液相色谱仪的流程示意
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