【摘要】：体细胞突变研究的遗传性状，是由一个遗传上纯一的细胞群体来表现的。图6-3显示了利用溴尿嘧啶加可见光法选择营养缺陷突变型的实验模式。在基本培养基上，野生型细胞能生长繁殖，并在DNA复制和生长过程中吸收培养基上的溴尿嘧啶，而发生了营养缺陷突变的细胞在基本培养基上不能生长，所以也就不会吸收或摄入溴尿嘧啶。实验的下一步是用可见光照射细胞群体，这时野生型细胞由于摄入的溴尿嘧啶参入DNA而对可见光敏感，最终导致细胞死亡。
体细胞突变研究的遗传性状，是由一个遗传上纯一的细胞群体来表现的。要在细胞群体中发现和分离那些出现概率极低的突变细胞，并使之形成性状可见或可测的细胞群，必须根据标志基因所涉及的代谢途径，设计和建立专门的选择系统。对于代谢类似物和药物的抗性突变，或者免疫学上抗原特性的突变细胞，可采用直接群选法，就是在含有一定量的药物或抗血清的培养基上选出突变细胞克隆。至于其他类型的突变，则要用经过富集突变型细胞的间接选择法。常用的有无胸腺嘧啶致死法，致死生长法（lethal-growth method）（又称青霉素法），溴尿嘧啶加可见光法等。图6-3显示了利用溴尿嘧啶加可见光法选择营养缺陷突变型的实验模式。在基本培养基上，野生型细胞能生长繁殖，并在DNA复制和生长过程中吸收培养基上的溴尿嘧啶，而发生了营养缺陷突变的细胞在基本培养基上不能生长，所以也就不会吸收或摄入溴尿嘧啶。实验的下一步是用可见光照射细胞群体，这时野生型细胞由于摄入的溴尿嘧啶参入DNA而对可见光敏感，最终导致细胞死亡。这时通过洗涤除去培养液中残留的溴尿嘧啶，将存活的细胞换入完全培养基中培养，即可使没有被可见光杀死的营养缺陷型细胞不断生长并形成营养缺陷型细胞克隆。
对于突变率极低的隐性突变，可以通过代谢抑制和间接选择相结合的方法来筛选，即先选出杂合子细胞，再从杂合子群体中选出纯合隐性突变细胞。§ 3.5中介绍的乌尔劳布和蔡辛用甲氨蝶呤加氚标记尿嘧啶核苷法，分步选出双氢叶酸还原酶突变细胞就是一个成功的实例。
图6-3 溴尿嘧啶加可见光选择法示意（引自T.T.Puck）
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