我国的克隆进展

我国的克隆进展

中国克隆羊“阳阳”产下“龙凤胎”

2001年8月8日上午，在陕西省杨凌区的西北农林科技大学的中国克隆动物基地再次成为令人关注的焦点，11时55分、12时15分，世界首批体细胞克隆山羊“阳阳”在这里成功产下一对“龙凤胎”。

这对安哥拉与济宁青山羊杂交一代山羊，是世界首例成年体细胞克隆山羊与胚胎克隆山羊通过自然交配产生的后代，“哥哥”名叫“欢欢”，体重1．4公斤，体长23厘米，体高24厘米；“妹妹”名叫“庆庆”，体重1．2公斤，体长22．5厘米，体高23厘米。

在分娩现场，“庆庆”由于体质相对较弱，还不能平稳走动外，“欢欢”已经能短距离的走动。刚出生的两只小家伙紧紧依偎着自己的妈妈觅乳。据基地的科研人员介绍，从生产及产后状况来看，两只小羊的情况良好。

作为世界首批体细胞克隆山羊，“阳阳”一年来生长发育完全正常，各项体格数据都接近它的细胞提供者。测定结果显示，“阳阳”的端粒酶活性与同龄的有性繁殖生产的山羊完全一致，没有任何衰老的迹象，这充分证明了“阳阳”具有旺盛的生命力。

自从“阳阳”出生以来，便吸引了国内外众多的游客纷至沓来。为便于向前来参观的人对比介绍体细胞克隆技术与胚胎克隆技术，克隆基地的科研人员将“阳阳”和5只雄性胚胎克隆安哥拉山羊放在同一个圈内供人们参观。

“阳阳”长到5个月后出现周期性发情。考虑到它年龄太小，科研人员每逢发情期便将它与其他公羊隔离。直至“阳阳”长到8个月时，才与一只名叫“帅哥”的6岁雄性安哥拉山羊自然交配受孕。“帅哥”是西北农林科技大学张涌教授1995年通过胚胎克隆技术繁殖的45只安哥拉山羊中最先移植出生的一只，它与另外4只雄性山羊为同一只胚胎克隆而来。“帅哥”比其他4只大两岁，体格明显强壮，饮食时也显得颇有些“霸道”。

刚做妈妈的“阳阳”，体质尚显得有些虚弱，不过出于妈妈的本能，还是在充满爱意的不停地舔舐着自己的孩子。

一直从事克隆技术研究的张涌教授告诉记者，体细胞克隆比胚胎克隆的技术难度要大许多。体细胞克隆山羊“阳阳”的自然受孕产仔，说明“阳阳”没有出现衰老的迹象，与普通山羊一样具有正常的生长、繁殖能力。“阳阳”的顺利生产，充分证明由我国科学家创造的具有自主知识产权的动物体细胞克隆技术研究走在了世界的先进行列。

一口奶呛死中国首头克隆牛，“育婴”室哭成一片

2001年10月13日上午，我国首头“克隆牛”在全国规模最大的转基因牛繁育基地——深圳绿鹏转基因牛繁育基地诞生，但一个小时后即窒息夭折，尸体解剖证实，这头克隆牛器官发育正常，在其气管和肺内发现牛奶，初步断定死于奶窒息。

首头克隆牛剖腹出世

早上8时许，在深圳绿鹏转基因牛繁育基地临时搭建的“产房”里，工作人员已经将怀胎近9个月的母牛用绳子固定了，对生产场地进行了冲洗、消毒，将各种医疗器械一一排好。这头母牛仿佛也知道自己的孩子快要出生似的，它好奇地东张西望，当工作人员给它拴绳子的时候，它似乎也显得比较配合。

8时50分，有着丰富的临床经验的中国农业大学动物医学院外科教授齐长明，给母牛注射了300毫升的麻醉药。这次为了保证我国首头“克隆牛”顺利生产，他提前4天就从北京赶来。他告诉记者，为了保证小牛的安全，经过慎重考虑决定采用局部麻醉。

9时许，我国首头克隆牛的剖腹手术静静地开始了。大家屏住呼吸，只见齐教授自信地拿起手术刀，先后切开母牛的皮肤、腹壁、子宫壁和羊膜，放出羊水，他用手伸到子宫里面一摸，“找到了！”随着他的叫声，记者看到小牛的一只浅粉色的后蹄露出，接着另外一只后蹄也露了出来。

这是令人难忘的一刻：9时15分，大家齐心协力将小牛从母体里拽了出来，这头令科学家们魂牵梦绕的我国首头“克隆牛”终于来到人间。这是一头身材匀称的黑白花牛，黑白相间的皮肤，眼睛骨碌碌地看着这个新奇的世界。经磅秤称出该克隆牛初生体重39公斤。随后，它被推到了早就准备好的“育婴房”。

10时17分，兽医师拿出了刚刚从博罗买来的牛初乳，倒进小牛专用的奶瓶给它喂奶，小牛美滋滋地喝着。

小牛夭折，“育婴”室哭成一片

“育婴房”里突然传来消息：“克隆牛”被奶呛着了，呼吸非常困难。正在替母牛缝针的齐教授和绿鹏公司副总经理张亚莉闻讯赶过来，他们和工作人员一起，将小牛倒立起来，拼命挤压其胸部。

抢救了10多分钟，依然回天无力。齐教授检查了小牛的瞳孔和呼吸，沉痛地告诉大家：“克隆牛”已经正式死亡。看到刚才还活蹦乱跳的“克隆牛”如今一动不动地躺在草垫子上，手里还拿着奶瓶的绿鹏公司技术员小范一下子瘫倒在地上，忍不住失声痛哭，小小的“育婴”室里大家顿时哭声一片。他们没想到，这头凝聚着中国农业大学许多专家教授和绿鹏公司全体员工多年心血的克隆牛，却死于这样一个小小的意外：被一口奶呛死了，这令在场所有的人感到遗憾。

经过解剖证实，“克隆牛”脏器发育一切正常，但肺呈大理石花纹，肺部肿大，边缘变钝，气管内有大量泡沫，支气管分肿处完全被气泡阻塞，并可辨认出有少量奶液，说明小牛确实因将牛奶呛入气管窒息而死。

32头母牛移植胚胎，4头成功受孕，1头产出小牛

大年初七，绿鹏公司的基地研究人员就开始紧张的克隆胚胎的移植工作，加班加点将克隆的胚胎解冻，移植到32头母牛体中，不久的妊娠检查表明有4头母牛成功受孕，其中两头为转基因胚胎的克隆牛，另外两头为单纯克隆牛。

怀有转基因克隆牛和单纯克隆牛的两头母牛突然先后流产。从此，他们对剩下的两头母牛的照顾就更加精心。令人遗憾的是，后来另一头怀孕母牛突然破水，腹中怀着的转基因克隆牛因缺氧窒息而死。

为了保证最后所剩的那头克隆牛能顺利生产，研究人员当即决定，给母牛进行剖宫产，时间就定在高交会期间，如果生产成功，将是给第三届高交会的最好献礼。没有想到，小牛居然会如此意外地被一口奶呛死。

新的克隆又将马上开始

“克隆牛”上游技术的关键人物——中国农业大学陈永福教授告诉记者，整个克隆过程是非常成功的，“克隆牛”出生后各项生命体征也非常正常，呛奶窒息完全属于意外事故，这表明我们的克隆技术已经基本成熟，完全有能力用克隆技术来生产转基因动物。它也标志着我国动物转基因技术将有重大革新。

绿鹏公司副总经理张亚莉告诉记者，我们会吸取这次的经验教训，继续培育繁殖“克隆牛”和“转基因克隆牛”。由于冷冻库里还保存着大量的科隆胚胎，她表示新的克隆将马上开始。

2000年6月16日，世界首例成年体细胞克隆山羊在西北农林科技大学种羊场顺利诞生。这标志着我国动物体细胞克隆技术已跻身于世界先进行列。这只体细胞克隆山羊起名“元元”，体长36厘米，体高30厘米，体重2．8公斤，毛色为青灰色。

6月18日，“元元”由于肺部发育缺陷，造成呼吸困难，导致呼吸衰竭于凌晨1时05分死亡。

6月22日，第二只体细胞克隆山羊“阳阳”又在中国西北农林科技大学出生。

我国两头皮细胞克隆牛“康康”“双双”通过专家鉴定

2001年12月22日，我国两头皮细胞克隆牛——“康康”和“双双”在山东省莱阳农学院通过了国内专家的鉴定。

鉴定委员会由中国动物学会理事长、中国大熊猫克隆首席科学家、中科院动物研究所陈大元教授等8位专家组成。

经过对两头小牛的DNA分析，专家认为克隆牛遗传物质与生产的母牛无亲缘关系，而与提供细胞的牛犊一致，从而证明这两头牛的确为克隆牛。

专家们充分肯定了这次研究中三项独特的技术：一是采用点击去核法，对卵母细胞损伤较小；二是采用负压气相系统进行重构胚的培养，有效提高了囊胚发育率；三是采用了摄氏零下35度冷冻保存的细胞作为核供体，并取得了成功。

与国际克隆技术相比，专家们认为此项研究成果达到了国际先进水平，在某些技术方面达到了国际领先。专家们指出，此项技术具有广阔的应用前景，对我国牛胚胎工程技术的产业化将起到很大推动作用。

据了解，这两头牛成长状况良好，各项生理指标正常。最近一次的体重测量结果中，“康康”已达到71公斤，“双双”为71．5公斤，生长较快。

克隆羊“阳阳”满四岁，四代同堂未变异

2004年6月22日，出生于陕西杨凌的中国首批成年体细胞克隆山羊“阳阳”，迎来了她四岁的生日。目前已四代同堂的“阳阳”生长发育正常，仍没有出现早衰等其他变异现象。

英国克隆绵羊“多利”的过早去世，在世界各国引起了极大反响，使人们对克隆羊是否容易出现早衰产生疑问。中国克隆山羊“阳阳”目前生长发育一切正常，但其后期会不会出现变异现象还有待观察。

2000年6月16日，由西北农林科技大学动物胚胎工程专家张涌教授培育的世界首例成年体细胞克隆山羊“元元”在该校种羊场顺利诞生。“元元”由于肺部发育缺陷，只存活了36小时。同年6月22日，第二只体细胞山羊“阳阳”又在西北农林科技大学出生。2001年8月8日，“阳阳”在西北农林科技大学产下一对“龙凤胎”，表明第一代克隆羊有正常的繁育能力。

2003年2月26日，克隆羊“阳阳”的女儿“庆庆”产下千金“甜甜”，2004年2月6日“甜甜”顺利产下女儿“笑笑”。“阳阳”家族实现四代同堂。这不仅表明第一代克隆羊具有生育能力，而且其后代仍具有正常的生育能力。

目前，“阳阳”与她的女儿“庆庆”、外孙女“甜甜”和曾孙女“庆庆”无忧无虑地生活在一起。据介绍，截至今年5月底，前来参观的各界人士已超过100万人次。

中国克隆动物研究大事记

20世纪60年代，生物学家童第周对金鱼、鲫鱼进行细胞核移植。

1990年5月，西北农业大学畜牧所克隆一只山羊。

1992年，江苏农科院克隆一只兔子。

1993年，中科院发育生物学所与扬州大学农学院合作，克隆一只山羊。

1995年7月，华南师范大学与广西农业大学合作，克隆一头奶牛、黄牛杂种牛。

1995年10月，西北农业大学畜牧所克隆6头猪。

1996年12月，湖南医科大学人类生殖工程研究室克隆6只老鼠。中国农科院畜牧所克隆一头公牛犊。

1999年6月，中国科学院动物研究所研究员陈大元率领的研究小组，通过将大熊猫体细胞植入去核后的兔子卵细胞中，成功地培育出了大熊猫的早期胚胎。

同年l0月，中科院动物研究所和福州大熊猫研究中心合作首次培植成功异种克隆大熊猫早期胚胎，这表明我国的大熊猫研究再次走到世界前列。

2000年5月，我国科技人员利用胚胎克隆出两只小白兔。

2000年6月，西北农林科技大学生物工程研究所培育出中国第一例成年体细胞克隆山羊，取名“阳阳”。

2001年8月8日，“阳阳”在西北农林科技大学产下一对“龙凤胎”，表明第一代克隆羊有正常的繁育能力。

2001年10月，中国首例克隆牛诞生，但出生后1小时20分钟后夭折。

2001年12月，我国两头皮细胞克隆牛通过专家鉴定。

2003年2月26日，克隆羊“阳阳”的女儿“庆庆”产下千金“甜甜”。

2004年2月6日，“甜甜”顺利产下女儿“笑笑”。“阳阳”家族实现四代同堂。这表明不仅第一代克隆羊具有生育能力，其后代仍具有正常的生育能力。