绿脓杆菌琼脂平板特点

二、产气荚膜梭菌

(一)临床意义

产气荚膜梭菌的主要致病物质是外毒素、多种侵袭性酶类和荚膜。外毒素有12种，根据外毒素种类，该菌分为A、B、C、D、E 5种毒素型。

本菌可导致气性坏疽、食物中毒和坏死性结肠炎。①气性坏疽:属严重的创伤感染，特征为组织坏死、水肿、胀气、全身中毒，好发于下肢，死亡率高，常为2种以上细菌混合感染。②食物中毒:主要由A型菌株污染食物引起，临床表现为腹痛、腹胀、水样腹泻，一般1～2 d后自愈。③坏死性结肠炎:主要由C型菌株污染食品引起，由β毒素导致肠黏膜出血坏死。

(二)生物学特性

1．形态染色产气荚膜梭菌为革兰阳性粗大杆菌，菌体长3～19μm，宽0．6～2．4μm，芽胞呈椭圆形，直径小于菌体，位于中央或次极端，但在组织和培养基中很少形成芽胞。本菌无鞭毛，在机体内可形成明显的荚膜。

2．培养特性　本菌厌氧，但要求不严格。生长繁殖迅速，在血琼脂平板上培养24 h，菌落直径2～4 mm、表面光滑、圆形、凸起、边缘整齐。多数菌株有双层溶血环，内环为完全溶血环，是θ毒素所致，外环为不完全溶血，与α毒素有关。在卵黄琼脂平板上，菌落周围出现乳白色混浊圈。是由于此菌产生的α毒素(卵磷脂酶)分解卵黄中的卵磷脂导致。若在培养基中加入α毒素(卵磷脂酶)的抗血清，则不出现混浊圈，该现象称为Nagler反应。在庖肉培养基中生长迅速，产生气体，肉渣不被消化，但呈粉红色。在牛乳培养基中，能分解乳糖产酸使酪蛋白凝固，同时产生大量气体(H₂和CO₂)将凝固的酪蛋白冲成蜂窝状，并向上推挤液面上的凡士林层，甚至冲开棉塞，称为“汹涌发酵”现象，此现象为本菌特征。

3．生化反应本菌能发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖，产酸产气。明胶液化试验阳性，硫化氢试验阳性，吲哚试验阴性。主要代谢产物为乙酸和丁酸，有时也形成丁醇。

(三)微生物学检验

从深部创口采集标本直接涂片染色，镜检见革兰阳性有荚膜的粗大杆菌，镜下白细胞少且形态不规则，伴有其他杂菌，即可初步报告结果。标本可直接接种于血琼脂平板和卵黄琼脂平板培养，或在庖肉培养基增菌培养8～10 h后，转种于血琼脂平板和卵黄琼脂平板，Nagler反应阳性。在牛乳培养基中，呈现“汹涌发酵”现象。