【摘要】：引起发荧光的能量种类很多，如光能、化学能等，由光激发所引起的发光称为光致荧光。荧光分子将吸收的光能转变成荧光的百分率称荧光效率。因此荧光物质的保存应注意避光和避免与其他化合物的接触。只有那些能产生明显荧光的有机化合物才能作为荧光色素。被某些酶作用后也可产生荧光的物质，如4-甲基伞酮和对羟基苯乙酸。
一、荧光的基本知识
1.荧光 某些化学物质能从外界吸收能量而进入激发态，当其从激发态再回复到基态时，过剩的能量以电磁辐射的形式释放（即发射荧光）。引起发荧光的能量种类很多，如光能、化学能等，由光激发所引起的发光称为光致荧光。荧光发射的特点是产生荧光的物质在接受激发光能后即刻发光，而一旦停止供能，发光（荧光）现象也随之消失。
2.荧光效率 荧光物质吸收光能后不会将全部光能都转变成荧光，部分以其他形式释放。荧光分子将吸收的光能转变成荧光的百分率称荧光效率。
荧光效率=发射荧光的光量子数（荧光强度）/吸收光的光量子数（激发光强度）
3.荧光淬灭 荧光物质在受到激发光较长时间的照射或在某些理化因素（如紫外线照射、高温、苯胺、碘、硝基苯等）作用后会减弱甚至消退，称为荧光淬灭。因此荧光物质的保存应注意避光（特别是紫外光）和避免与其他化合物的接触。
4.荧光物质 许多物质都可产生荧光现象，但并非都可用作为荧光色素。只有那些能产生明显荧光的有机化合物才能作为荧光色素。
常用的荧光色素有：异硫氰酸荧光素（FITC，呈黄绿色荧光）、四乙基罗丹明（RB200，呈橘红色荧光）、四甲基异硫氰酸罗丹明（TRITC，呈橙红色荧光）、藻红蛋白（PE，呈红色荧光）。
被某些酶作用后也可产生荧光的物质，如4-甲基伞酮和对羟基苯乙酸。另外镧系稀土元素铕（Eu3+）、铽（Tb3+）、铈（Ce3+）等的螯合物经激发后也可发射特征性荧光。
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