家兔肠缺血-再灌注损伤

第二节　家兔肠缺血-再灌注损伤

实验目的

（1）复制家兔实验性肠缺血-再灌注损伤模型。

（2）观察家兔实验性肠缺血-再灌注损伤时小肠的形态学变化。

实验对象及相关用品

1.实验对象

家兔，体重2.5kg左右，雌雄不限。实验前禁食12h，自由饮水。

2.实验相关用品

3%戊巴比妥钠（1mL/kg）、肝素（125U/mL）、生理盐水、兔常规手术器械一套、兔手术台、生物信号采集分析系统、压力换能器、张力换能器、动脉导管、动脉夹、烧杯、注射器、止血纱布、婴儿秤。

实验分组

（1）假手术组。

（2）持续缺血组。

（3）缺血-再灌注组。

观测指标

动脉血压、腹腔渗出情况、小肠形态学变化（淤血、点状出血、水肿等）。

实验步骤

（1）家兔称重后耳缘静脉注射3%戊巴比妥钠（1～1.5mL/kg）麻醉，仰卧位固定于兔手术台上。剪去颈部被毛，行颈前正中切口（切口范围：甲状软骨下缘→胸骨上切迹），分离一侧颈总动脉，长2～3cm，穿线备用。分离气管做气管插管术，并将插管的一侧接呼吸描记装置，描记呼吸。

（2）在剑突下方1.5cm处向下沿正中线做长约5cm的腹正中切口，打开腹腔，用生理盐水纱布将内脏轻轻左移，暴露出脊柱及腹膜后组织，找到齐右肾门对侧、垂直从腹主动脉分出的肠系膜上动脉，并将其分离出来，穿双线备用（图9-2）。

图9-2　家兔肠系膜上动脉示意图

（3）朝近心端方向行颈总动脉插管，并与压力换能器相连，以记录血压（图9-3）。

图9-3　家兔颈总动脉示意图

（4）记录各生理指征。在观察完各项指标正常值后，沿动脉行走方向在肠系膜上动脉上面放置一根长2～3cm的橡胶管，用棉线将其与肠系膜上动脉一同结扎，结扎要牢固，完全阻断肠系膜上动脉的血流。记录结扎后0、5、15、30和60min时的各项指标。

（5）缺血-再灌注组家兔在缺血60min时用剪刀剪断结扎橡胶管上的棉线，移开橡胶管，用手在肠系膜上动脉远心端触摸，感觉有动脉搏动时，说明小肠血流恢复，也可观察小肠颜色变化来判断小肠血流恢复情况。记录松开结扎后0、5、15、30和60min时的各项指标。持续缺血组则不松开，继续对肠系膜上动脉血流的阻断作用。

注意：假手术组，仅在肠系膜上动脉下穿线；持续缺血组除不松解结扎线外，其余均与缺血-再灌注组相同。

注意事项

（1）移动内脏时动作要轻柔，不要人为过度牵拉肠管，以免引起低血压而影响实验结果。

（2）分离肠系膜上动脉时要小心细致，不要使用锐利器械，以免损伤大血管，造成大出血。

（3）每次观察完肠壁颜色、水肿、出血点和肠腔渗出情况后，要用生理盐水湿润的纱布覆盖小肠，以防肠壁干燥而影响各项指标的观察。

思考题

临床上哪些情况下会发生肠缺血-再灌注损伤？有哪些防治措施或防治原则？

（南华大学医学院　韦星）