一、概 述
1981年分别从2例伴有肢端肥大症的胰腺肿瘤病人瘤组织中分离出具有很强生长激素释放激素(GHRH)活性的物质,并鉴定了它们的结构是40肽和44肽。以后从人的下丘脑中也分离出GHRH,并证明其结构就是其中的44肽。
GHRH刺激垂体分泌生长激素(GH),GHRH神经元胞体在腹内侧核及弓状核。损毁这些核团或给抗GHRH血清,则GH分泌的脉冲消失弱。可见GHRH与生长抑素(SS)共同决定了GH的脉冲式分泌形式,目前还认为,它在治疗垂体性侏儒症、糖尿病、促进创伤愈合、骨折和烧伤愈合方面有重要作用。
二、病人准备
1.药物 葡萄糖负荷、胰岛素负荷、多巴胺、溴隐亭、可乐定以及精氨酸负荷等影响GH的分泌,但对GHRH无影响,可见这些因素对GH分泌的影响不是通过GHRH途径的。
2.饮食 伴随进食GHRH血浓度升高,在60～120min增高基础值的2～3倍。
3.影响因素 影响GH分泌的因素,如睡眠、运动等均对GHRH无影响。
三、标本采集
1.采集时间 清晨空腹采集静脉血2.0ml,于EDTA-Na2和蛋白酶抑制剂的管中(最终浓度为1000k U/ml),立即冰水浴送检。
2.标本保存 收到标本后立即冷却离心分离血浆存-20℃待测,为避免反复冻融应分装小管保存。
四、试验方法及正常参考范围
酶联免疫吸附法:应用双抗体夹心法测定标本中人促生长激素释放激素水平。用纯化的人促生长激素释放激素抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入待测血浆,再与HRP标记的促生长激素释放激素抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的促生长激素释放激素呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人促生长激素释放激素的水平。
正常参考范围 空腹血浆GHRH浓度为(10.3±4.l)ng/L,无性别差异;孕妇分娩前为(8.9±2.6)ng/L,分娩后为(11.6±3.3)ng/L,脐带血中的GHRH明显升高,为(63.0±27.1) ng/L。
五、临床意义
1.肢端肥大和巨人症患者GHRH降低。
2.垂体性侏儒GHRH分泌升高,若病变在下丘脑则GHRH水平降低,甚至测不出,有助于鉴别侏儒的病因所在。
3.肝硬化和肾衰竭病人的GHRH与正常人无差异,有人观察分别为(9.6±4.2)ng/L和(10.1±6.3)ng/L。
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