吞噬细胞功能检测

（一）中性粒细胞功能的检测

1．中性粒细胞运动功能的检测 中性粒细胞的运动可以分成随机运动（类似于布朗运动）和定向运动（趋化运动）。

测定中性粒细胞定向运动的常用方法有体内试验法（皮肤窗法）和体外试验法，体外试验法又有滤膜小室法和琼脂糖凝胶平板法。

2．中性粒吞噬和杀菌功能的检测

（1）细胞内杀菌功能检测：将受检细胞悬液和活的白色念珠菌悬液按一定比例混合，保温后加亚甲蓝溶液做活体染色，取样涂片镜检。在所计数的100或200个吞噬细胞中，统计胞内吞有白色念珠菌的吞噬细胞数，可计算

吞噬率＝（吞有菌体的中性粒细胞数／200）×100%

杀菌率＝（胞内有蓝色菌体的中性粒细胞数／200）×100%

吞噬指数＝（中性粒细胞胞内的菌细胞数／200）×100%

（2）硝基四氮唑蓝（NBT）还原试验：中性粒细胞在杀菌过程中能量消耗剧增，磷酸己糖旁路代谢活力增强，6－磷酸葡萄糖氧化脱氢，如此时加入NBT，NBT接受氢后从淡黄色还原成点状或块状蓝黑色甲臜颗粒（在胞质内）。NBT还原试验主要检测中性粒细胞的杀菌能力。

（3）化学发光测定法：中性粒细胞在吞噬经调理的金黄色葡萄球菌过程中，伴有化学发光现象，若在培养液中加入鲁米诺等发光剂可增强其发光效应，故可用化学发光仪测定中性粒细胞的吞噬功能及其代谢活性。化学发光测定法可用以研究中性粒细胞的吞噬功能、代谢活性、杀菌功能，以及血清的调理吞噬功能。

（二）巨噬细胞功能的检测

1．炭粒廓清试验 给小鼠静脉定量注射炭粒悬液（印度墨汁），间隔一定时间反复取静脉血，测定血中炭粒浓度，根据血流中炭粒被廓清的速度，判断巨噬细胞的吞噬功能。

2．吞噬功能检测 将受检细胞与适量较大颗粒抗原（如鸡红细胞）混合后，置37℃保温后离心取细胞制成涂片，染色镜检，分别计算吞噬百分率和吞噬指数。

3．巨噬细胞溶酶体酶的测定 巨噬细胞溶酶体酶的测定主要检测酸性磷酸酶、非特异性酯酶和溶菌酶等活性，用以评价巨噬细胞的杀菌功能。

4．巨噬细胞促凝血活性测定 激活巨噬细胞可产生一种与膜结合的凝血活性因子，加速正常血浆的凝固。实验证明当巨噬细胞与LPS、HBsAg或肿瘤相关抗原等温育后，血浆凝固时间明显缩短。

（关有良）