杂交方法与技术

三、杂交方法与技术

亲本杂交组合选定后，杂交能否成功，能否获得杂交种子，最主要的是全面掌握杂交技术。油橄榄近缘种杂交主要的步骤如下：

(一)采集花粉

杂交能否成功，最关键的一步是采集有生命活力的花粉。父本花粉必须在授粉前预先准备好。在云南油橄榄种植区尖叶木樨榄的花期较晚，比油橄榄晚开花10～15天。所以在同一区域种的尖叶木樨榄，父本花粉跟不上授粉，必须到偏热的南方尖叶榄物候期较早的地方采集花粉，在昆明开展杂交授粉就必须到云南元江或四川会理一带采集花粉。预先确定采粉雄株，花期前用0.1%尿素水补充营养，促进开花。开花前用硫酸纸做袋套在花序上，开花时花粉自然落在袋中，集中收集。

收集到尖叶木樨榄花粉，应注意保持花粉的活力，及时放入干燥皿内干燥，在3～5℃低温条件下保存备用。授粉前要对花粉发芽率进行测定，测定常用的方法：配制15%的葡萄糖(或蔗糖)液，加0.1%硼酸(滴)用悬滴法培养，3天后在显微镜下检查发芽率，一般为5%～20%。发芽率过低的花粉不能做授粉之用。

(二)去雄套袋

在油橄榄佛奥母株上选树冠中部外围的花枝做授粉枝，在花枝上选小花序粗大的花朵(小花序顶端3～5朵小花)作授粉对象。小花朵去雄要在花蕾膨大，颜色由淡绿色转变为黄白色，花瓣裂开尚未开放时。油橄榄常在晴天早晨开花，去雄工作应在清晨9时前进行。具体方法是用镊子轻轻一碰花瓣，花瓣展开，用镊子将2个花瓣雄蕊一起摘掉，保留中间子房。在一个花枝上将去雄的花留下，将未去雄的花全部摘除，并用0.1%硼酸液喷施，随即套袋。

(三)授粉

将上述具有生活力的花粉，用小型胶皮喷粉器喷粉或用毛笔撒粉，在已去雄的花朵上授粉。少量授粉时可用毛笔蘸花粉直接蘸在柱头上，授粉后仍需继续套袋，保持5～7天去袋，任其自然生长，发育成果实。

云南省林业科学研究所1978～1979年两次授粉试验共套袋120个，授粉2262朵花，其中一次性授粉1824朵，坐果34个，坐果率1.5%;二次授粉246朵花，坐果13个，坐果率4.9%;三次授粉192朵花，坐果11个，坐果率5.2%，共收获杂交种58个果。在一个花序上一次授粉，坐果率较低。同一花序上二次授粉，坐果率提高3%，三次授粉仅提高坐果率0.3%，增效不显著。用以上数据进行方差分析，结果见表6－21。

表6－21　尖叶榄与油橄榄杂交授粉方差分析表

通过以上方差分析看出：

(1)杂交授粉率的高低与授粉处理次数关系密切，授粉一次坐果率为1.5%，授粉二次坐果率4.9%，比一次授粉提高3.4%，达到极显著水平;授粉三次为5.2%，比授粉二次提高坐果率0.3%，差异不显著。

(2)该杂交试验，授粉效果以二次最适用。