消减杂交技术和抑制性消减杂交技术

消减杂交技术（subtractive hybridization，SH）最早用于寻找由于缺失而导致遗传性疾病的相关基因。其后Liang等将其应用于2个不同的cDNA文库，将两者变性后复性再进行杂交；然后，采用亲和素-生物素结合或羟基磷灰石层析技术分离未杂交的部分，由此获得呈差异表达的基因片段。该技术的主要缺点在于无法对低度表达的基因进行克隆，一些改良后的消减杂交技术如代表性差异分析法（RDA）、酶降解消减技术（EDS）等依然存在上述问题。

抑制性消减杂交技术（suppression subtractive hybridization，SSH）则是一种简便有效，以抑制PCR和消减杂交为基础的分离差异表达基因的新技术。该技术的操作流程包括两轮杂交和两轮PCR扩增，可以有效扩增目的cDNA片段。抑制性杂交技术克服了消减杂交技术无法克隆低度表达基因的缺陷，并且降低了假阳性率，相对于其他差异显示技术具有很大的优越性。

差异显示技术分析正常肝细胞、普通肝癌细胞和具有某一特性（如侵犯肝门静脉、易转移、耐药等）肝癌细胞的表达基因的差异，可以比较系统而完整地揭示肝癌发生、发展过程中相关基因存在状态和功能状况。Hsu等通过比较肝癌与非肝癌组织，克隆出了与MXR7（从抗二羟蒽酮的人胃癌细胞中分离的特异基因片段）序列相同的一段cDNA，将其制成探针检测肝癌组织中MXR7mRNA时发现：在＜3cm的肝癌中，MXR7mRNA的表达（77%）显著高于AFPmRNA的表达（41%）及血清AFP的升高（43%），为进一步研究其生物学特性提供根据；并对113例单灶原发性肝癌患者进行了4年随访研究，结果发现：MXR7mRNA的表达与血清AFP升高、AFPmRNA、CD24mRNA的表达水平以及肝癌浸润、分级分期密切相关，提示MXR7mRNA可望用作肝癌早期诊断的敏感指标。